“水产生物病害与防治”专栏
为加强我国从事水产动物病害基础和应用研究的科研及技术人员的交流,促进我国水产动物病害研究和防治水平的提高,保障我国水产业的持续健康发展,本刊特开设“水产生物病害与防治”专栏,为广大水产科技工作者提供交流的平台。
中华鲟 IFN-γ 的免疫调控作用
郑楚文1, 袁汉文1, 田光明1, 李 骞1,张书环2, 许巧情1*, 危起伟2*
1. 长江大学动物科学学院,湖北 荆州 434020;
2. 中国水产科学研究院长江水产研究所,农业农村部淡水生物多样性保护重点实验室,湖北 武汉 430223
为了解中华鲟 IFN-γ 的免疫调控作用,实验通过中华鲟转录组获得 IFN-γ cDNA 序列,构建重组表达质粒 pTRI-st-IFNγ,原核表达 IFN-γ 蛋白,检测其在病毒和细菌感染过程中的免疫调控作用。SDS-PAGE 显示,中华鲟 IFN-γ 重组蛋白大小为 19.17 ku,以可溶性表达为主,浓度为 0.998 mg/mL;荧光定量 PCR 显示,IFN-γ 蛋白能够诱导中华鲟肾脏细胞中下游相关抗病毒基因 Mx、Viperin 和 CXCL 家族中 CXCL11-L1、CXCL11-L2 表达;与 EPC 细胞共孵育能够有效抑制鲤春病毒血症病毒 (spring viraemia of carp virus,SVCV)引起的细胞病变和增殖,并对 SVCV 病毒的 G、P、N 3 个基因表达量呈现出极显著性下调;在体外能够调控抑制嗜水气单胞菌、中间产气单胞菌和维氏气单胞菌并对其生长表现出明显的抑制作用。
中华鲟;IFN-γ;免疫调控;生物学功能
文中图片
IFN-γ 小量诱导 SDS-PAGE 电泳和 Western blotting 分析
(a) IFN-γ 小量诱导 SDS-PAGE 结果,M. 180 protein marker;1. 加 IPTG 诱导组;2. 不加 IPTG 未诱导组;3. 不加 IPTG 空载体对照。(b)IFN-γ 小量诱导 Western blotting 结果,4. 空载体对照;5. 未诱导组;6. 诱导组
IFN-γ 重组蛋白可溶性鉴定与纯化
(a) IFN-γ 重组蛋白可溶性鉴定结果:1. 包涵体沉淀表达结果;2. 上清液表达结果。(b) IFN-γ 蛋白纯化及 Western blotting 鉴定结果
IFN-γ 诱导中华鲟肾脏细胞系抗病毒基因 Mx、Viperin 的表达
IFN-γ 诱导中华鲟肾脏细胞系 CXCL 家族中 CXCL11-L1、CXCL11-L2 的表达
IFN-γ 诱导 EPC 细胞抗 SCVC 病毒结果
(a)RT-qPCR 检测 SCVC-G 表达结果;(b)RT-qPCR 检测 SCVC-P 表达结果;(c)RT-qPCR 检测 SCVC-N 表达结果;(d)EPC 细胞病变结果 (箭头处代表细胞 CPE 效应)。*P < 0.05,**P < 0.01,***P < 0.001
IFN-γ 蛋白抗嗜水气单胞菌、中间产气单胞菌、维氏气单胞菌的结果
文章引用格式
郑楚文, 袁汉文, 田光明,等.中华鲟 IFN-γ 的免疫调控作用[J].水产学报.DOI: 10.11964/jfc.20200712346.
Zheng C W, Yuan H W, Tian G M, et al. Immune regulation role of IFN-γ in Acipenser sinensis[J]. Journal of Fisheries of China. DOI: 10.11964/jfc.20200712346.
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