华南农业大学彭新湘和朱国辉团队揭示水稻PLGG1在运输乙醇酸/甘油过程新机制

科技工作者之家 2021-01-25

来源:植物生物学

研究者为了确定OsPLGG1a和OsPLGG1b在转运乙醇酸和甘油过程中的作用,首先在非洲爪蟾卵母细胞和酵母中外源表达这些蛋白。分析结果表明,OsPLGG1a和OsPLGG1b都具有运输乙醇酸和甘油的能力。

为了阐明OsPLGG1a和OsPLGG1b在水稻中的作用,研究者使用RNA干扰技术产生多种OsPLGG1 RNA干扰株系,包括特异性沉默OsPLGG1a或OsPLGG1b,以及双重沉默。在沉默的特异性方面,研究者未能单独沉默两个同源基因中的任何一个,所有转基因株系同时表现出两个基因的下调。对于这些不同的OsPLGG1-RNAi株系进行表型分析显示,突变体具有多种生理和发育性的缺陷,包括:较低的光合速率,降低的株高,分蘖无效,结实率下降等。此外,乙醇酸、甘油和乙醛酸的积累在OsPLGG1-Ri株系中显著增加。

因为无法产生特异性下调的OsPLGG1-RNAi单突变体植株,研究者使用CRISPR/cas9方法来产生单个的敲除突变体。在正常环境CO2浓度的条件下(400 ppm),osplgg1a突变体叶片呈淡黄色,植株矮化,株高比野生型矮约40%。osplgg1b突变体的叶色与野生型相似,株高略矮。但当突变体植株生长在高浓度CO2的条件下时,这些形态缺陷的表型几乎完全恢复。

为了测定osplgg1a和osplgg1b植株光呼吸代谢产物的变化,研究者采用了气相色谱-质谱联用分析。分析结果表明与野生型相比,osplgg1a突变体中乙醇酸和甘油大量积累;osplgg1b突变体植株中乙醇酸和甘油水平也有2倍和1.5倍的增长。除此之外,突变体中淀粉含量减少、产量下降。

亚细胞定位分析表明,OsPLGG1a和OsPLGG1b分别位于叶绿体的内膜和外膜。LCI分析、BiFC分析结合酵母双杂交实验表明,OsPLGG1a和OsPLGG1b有直接的相互作用。

以上结果表明,OsPLGG1a和OsPLGG1b都是植物光呼吸代谢和生长所需的叶绿体乙醇酸/甘油转运蛋白,它们可能作为复合物发挥作用。

 OsPLGG1aOsPLGG1b介导光呼吸循环中的转运过程模式图

来源:PlantBiotech 植物生物学

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