推荐阅读文章
一株金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性
葛志毅 韩生义 曹小安 周建华 刘婷婷 刘永生 李学瑞
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见的致病菌,致人或动物发生多种感染性疾病。近几年金黄色葡萄球菌耐药现象越来越严重,给治疗防控带来了很大的麻烦。噬菌体是一种细菌病毒,用于治疗具有特异性强、指数级增长和不对其他正常菌群产生作用的特点,是一种很有希望的抗生素替代品。本实验以患奶牛乳腺炎的奶牛乳汁中分离的致病性金黄色葡萄球菌为宿主进行噬菌体的分离筛选,对筛选的噬菌体进行生物学特性分析及基因组分析。研究结果表明噬菌体vB_SauS_SAP3是一株窄谱的能够耐受一定温度和碱性环境的长尾科新型噬菌体,该研究为金黄色葡萄球菌噬菌体的研究和后续的治疗防控提供了理论基础。
摘要
【背景】金黄色葡萄球菌作为一种条件致病菌,在临床感染中扮演着重要的角色,需要研究更多更有效的防治手段。
【目的】分离金黄色葡萄球菌噬菌体,研究其生物学特性,从而为金黄色葡萄球菌的替代防治提供理论借鉴。
【方法】以金黄色葡萄球菌D085为宿主从污水中分离得到一株噬菌体,命名为vB_SauS_SAP3,用PEG8000浓缩、氯化铯密度梯度离心获得高纯度的噬菌体,1%乙酸双氧铀染色噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(Multiplicity of infection,MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH值稳定性及有机溶剂对噬菌体活性的影响。平衡酚法获取噬菌体基因组,illumina测序技术和SPAdes软件进行基因组测序分析。
【结果】电镜下,噬菌体SAP3头部直径为60±5 nm,尾部长170±5 nm。噬菌体vB_SauS_SAP3还能裂解5株金黄色葡萄球菌和1株产色葡萄球菌,其最佳感染复数为0.1。噬菌体vB_SauS_SAP3潜伏期为20 min,60 min后进入平台期,裂解量约为210 PFU/cell;对45 °C以下温度有一定耐受性,超过45 °C开始急剧失活;能在中性pH值时保持稳定活性,酸性环境会使其急剧失活,对碱性环境有一定的抵抗力;对氯仿和异戊醇不耐受。其基因组分析结果表明:噬菌体基因组大小为41 950 bp,GC含量为35.42%,预测有65个开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)。进化分析表明,噬菌体vB_SauS_SAP3属于长尾科噬菌体,是一种新型的噬菌体。
【结论】噬菌体vB_SauS_SAP3是一株窄谱的能够耐受一定温度和碱性环境的长尾科新型噬菌体,对其研究可为金黄色葡萄球菌噬菌体的研究提供理论材料。
图1 vB_SauS_SAP3噬菌斑
Figure 1 Plaques of phage vB_SauS_SAP3
图2 噬菌体vB_SauS_SAP3的电镜照片
Figure 2 Transmission electron microscopy of phage vB_SauS_SAP3
图3 噬菌体vB_SauS_SAP3生物学特性
Figure 3 Biological characteristics of phage vB_SauS_SAP3
图4 噬菌体vB_SauS_SAP3基因组核酸类型鉴定结果
Figure 4 Identification results of nucleic acid type of phage vB_SauS_SAP3 genome
图5 噬菌体基因进化分析
Figure 5 Phylogenic analysis of phages
长按二维码关注
微生物学通报
Microbiology China
http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn
010-64807511
tongbao@im.ac.cn
本期制作:赵彬涵
点击“阅读原文”获取全文