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噬菌体粉剂的制备及抗逆性与稳定性
王合叶 徐沁妍 姜越 张莉莉 孙利厂 王冉
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细菌耐药性是全球重要的公共卫生问题,而养殖业是产生细菌耐药性的重要源头之一。减少抗生素的使用是解决耐药性问题的关键,噬菌体在养殖领域是一种潜在的替抗产品,但抗逆性和稳定性有限一直是限制噬菌体应用的重要问题。噬菌体包被技术能够提高噬菌体的环境抗逆性,本研究选用嵌段式聚醚F-68为包被剂,脱脂米糠为载体制备噬菌体粉剂,显著提高了噬菌体的抗逆性与稳定性。研究为噬菌体粉剂的制备和应用提供了新思路。
摘要
【背景】细菌耐药已成为全球严重的公共卫生问题,养殖业是细菌耐药性产生的重要源头之一。我国正在全力推进“减抗、限抗、禁抗”战略。新型安全高效的抗生素替代品成为当前养殖业的重要需求。噬菌体因其能有效裂解细菌被认为是一个重要的突破口,但噬菌体作为活体微生物,在保存和使用时存在稳定性差、利用率低等问题。
【目的】制备噬菌体粉剂,提高噬菌体的抗逆性和稳定性,为噬菌体在养殖业中的应用提供技术支持。
【方法】选用大肠杆菌噬菌体BpEP4,采用嵌段式聚醚F-68包被噬菌体,然后负载于脱脂米糠制得噬菌体粉剂,双层琼脂平板法测定粉剂的噬菌体效价,研究其耐高温性能、pH稳定性与常温保存稳定性。
【结果】噬菌体粉剂可以在100 ℃保持噬菌体的活性,pH耐受范围为2.0−12.0。常温下保存3个月噬菌体效价无明显降低。
【结论】粉剂显著提高了噬菌体的抗逆性与稳定性,具有很好的应用价值和推广前景。
图1 不同包被剂对于噬菌体效价的影响
Figure 1 The effect of different coating agents on the phage titer
图2 F-68浓度对于噬菌体效价的影响
Figure 2 The effect of concentration of F-68 on the phage titer
图3 不同载体对于噬菌体效价的影响
Figure 3 The effect of different carriers on the phage titer
图4 噬菌体粉剂和液体噬菌体的耐高温稳定性
Figure 4 The stability of phage powder and liquid phage against high temperature
图5 噬菌体粉剂和液体噬菌体的pH稳定性
Figure 5 pH stability of phage powder and liquid phage
图6 噬菌体粉剂和液体噬菌体在含不同胆盐浓度的模拟肠液中的稳定性
Figure 6 Stability of phage powder and liquid phage in simulated intestinal fluid with different concentrations of bile salt
图7 噬菌体粉剂和液体噬菌体的常温保存稳定性
Figure 7 Storage stability of phage powder and liquid phage at room temperature
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微生物学通报
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本期制作:赵彬涵
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