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科技工作者之家 2021-10-11
关于血浆NfL临床诊断价值的多中心验证研究专题一回顾:Simoa Homebrew方法开发专题(一)利用Simoa平台开发血浆p217+tau的高灵敏度检测方法Simoa单分子免疫阵列分析技术是目前市面上最灵敏的蛋白分子检测技术,其可以检测单个蛋白分子,灵敏度达到飞克级别。在肿瘤、神经、感染免疫、心血管、炎症、生殖、眼科等领域都有着广泛应用。
Simoa平台是一个开放的研究平台,除现有的商品化试剂盒之外,各领域的研究人员都可自行进行方法开发及分析。
来自英国伦敦和瑞典的科学家们利用自行研发的Simoa Homebrew试剂盒对血浆中的Nfl进行了检测和分析,文章发表于Nature Communications(IF=12.7)。A multicentre validation study of the diagnostic value of plasma neurofilament light 实验方法 脑脊液和血浆中NfL浓度的增高意味着有神经退行性病变,本研究将NfL作为神经退行性病变的标志物对两组人群进行了检测,两组标本由伦敦国王学院(KCL,n = 805)和瑞典BioFINDER Study(n = 1,464)提供。
根据检测所得的NfL浓度在13种神经退行性疾病、唐氏综合征(DS)、抑郁症等疾病中进行验证。
伦敦国王学院利用Quanterix商品化试剂盒,LLOQ 为0.174pg/mL,低浓度质控品的批内CV为7.5%,批间CV为12.8%;高浓度质控品的批内CV为9.5%,批间CV为13.8%。
而瑞典BioFINDER Study则采用Homebrew的方式,抗体和质控品来源于瑞典UmanDiagnostics AB公司,制备所得的试剂盒的LLOQ 为6.7pg/mL,低浓度质控品的批内CV为5.5%,批间CV为8.2%;高浓度质控品的批内CV为9.3%,批间CV为9.4%。
基于两组的QC数据,对Lund组中的所有样本做了1.18倍的校正,以用于所有后续分析。
实验结果 血浆NfL的浓度在所有皮质神经退行性疾病、肌萎缩侧索硬化症(ALS)和非典型帕金森病患者中显著升高,说明血浆NfL在临床上可用于鉴别帕金森病患者的非典型帕金森病、唐氏综合征患者的痴呆(DSAD)、精神疾病患者的痴呆以及认知障碍患者的额颞叶痴呆(FTD),此外,血浆NfL在所有年龄相关的切分中表现最好,假阳性率低。
图1. KCL( King’s College London)和Lund(Swedish BioFINDER study)两组样本中诊断组和对照组的血浆NfL浓度。
KCL(An=805)和Lund(Bn=1464)。
图2:血浆NfL对神经退行性疾病的诊断准确性。
(A)KCL组;(B)Lund组。
图3:血浆NfL诊断神经退行性疾病和抑郁症的准确性。
(A) 对照组>65岁,(B) 对照组
来源:上海生物芯片
原文链接:http://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzI1NTA5MTY1MA==&mid=2656041259&idx=1&sn=8f0ccdbb2326f2322256cb718e8232f3
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