α-淀粉酶的热稳定性是影响其应用的重要因素,开发温度耐受范围较宽的α-淀粉酶,具有较好的应用前景。本研究以前期实验得到的低温α-淀粉酶LamA为材料,分析钙离子的存在对LamA热稳定性的影响,结果显示钙离子明显提高了LamA的热稳定性,同时推测位点Asn120与钙离子的结合能够稳定低温酶LamA在较高温度下的结构,为今后相关酶类的工程改造提供理论基础。
图1 不同金属离子对LamA热稳定性的影响
Figure 1 Effects of different metal ions on thermo-stability of LamA
图2 LamA与其他α-淀粉酶的蛋白序列比对
Figure 2 The protein sequence alignment of LamA and other α-amylases using the DNAMAN
图3 黄粉虫幼虫α-淀粉酶钙离子结合区域的蛋白结构模拟
Figure 3 Protein structure simulation of calcium ion binding region of Tenebrio molitor larval α-amylase
图4 可溶性淀粉平板检验LamA及突变蛋白酶活力
Figure 4 Enzyme activity assay of LamA and mutant proteins by soluble starch plate medium
图5 温度对LamA及突变蛋白活性的影响
Figure 5 Effects of temperature on the activity of LamA and mutant proteins
图6 不同温度对LamA及突变蛋白稳定性的影响
Figure 6 Effects of temperature on the stability of LamA and mutant proteins
图7 5 mmol/L钙离子条件下N120与LamA的热稳定性
Figure 7 Comparison of thermal stability of N120 and LamA under 5 mmol/L calcium ion condition
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本期制作:赵彬涵
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