2008年:董志扬:通讯作者.Tel/Fax:+86-10-64807337;E-mail:dongzy@im.ac.cn 2007年:通讯作者:董志扬,研究员,主要从事纤维素降解酶研究.Tel:010-64807353;E-mail:dongzy@sun.im.ac.cn. 2006年:通讯作者:董志扬,E-mail:dongzy@sun.im.ac.cn 2005年:董志扬,通讯作者.Tel/Fax: 86-10-62551206; E-mail: Dongzy@sun.im.ac.cn
本发明公开了一种具有转酯活性的脂肪酶Lip-1及其编码基因与应用.本发明通过构建元基因组文库和活性筛选自云南洱源牛街热泉中分离到一个新的脂肪酶基因Lip-1,并且将该脂肪酶与芝麻的油体蛋白融合表达,通过体外人造油体重构实现了一步纯化和固定化脂肪酶Lip-1,并进行转酯反应.通过GC-MS测定表明,该脂肪酶具有良好的转酯活性以及有机溶剂和甲醇耐受性,可以有效的应用于生物柴油的生产.
董志扬 白林含 王丽 严伟 朱雅新
中国科学院微生物研究所%四川大学
2016-03-16
本发明公开了一株高产扬奇青霉α-半乳糖苷酶的里氏木霉菌株的制备方法及其应用.本发明的高产扬奇青霉α-半乳糖苷酶的里氏木霉菌株是将扬奇青霉α-半乳糖苷酶的编码基因和筛选标记基因导入宿主里氏木霉菌Trichoderma?reesei得到的菌.本发明利用里氏木霉cbh1强启动子及其信号肽序列在里氏木霉中实现了扬奇青霉α-半乳糖苷酶的高效分泌表达.通过试验证明:对高产扬奇青霉α-半乳糖苷酶的里氏木霉菌株进行发酵获得的发酵液的酶活力单位可达到119.16U/ml,且本发明的发酵工艺简单、原料廉价易得,大大降低了生产成本,非常适合工业生产及应用.
董志扬 林洁 陈秀珍 马枝枝 黄振邦 秦丽娜
中国科学院微生物研究所
2015-12-23
本发明公开了一种重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用.将本发明的Pgod基因导入里氏木霉Tu6△tku70中构建的重组里氏木霉Tu6△tku70::Pgod能够成功地表达重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶,而且表达量较高,发酵液中的酶活力可达到28U/mL;将发酵液中的重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶通过镍柱纯化,超滤浓缩得到的蛋白溶液中的酶活力可达到330U/mL,重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的比活力为407U/mg蛋白.采用本发明的方法制备的重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶具有很好的热稳定性和较好的酸碱耐受性,发酵工艺简单,不需转接,原料廉价易得,成本大大降低,可广泛应用于食品医疗领域中.
董志扬 马枝枝 陈秀珍 林洁 黄振邦 秦丽娜
2015-06-17
本发明公开了一种重组黑曲霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用.将本发明的Agod基因导入里氏木霉Tu6△tku70中构建的重组里氏木霉Tu6△tku70::Agod能够成功地表达重组黑曲霉葡萄糖氧化酶,而且表达量较高,发酵液中的酶活力可达到137U/mL,是目前产葡萄糖氧化酶菌株中摇瓶发酵酶活力的最高水平.将发酵液中的重组黑曲霉葡萄糖氧化酶通过镍柱纯化后测定的酶活力可达到342U/mL,重组黑曲霉葡萄糖氧化酶的比活力为155U/mg蛋白.采用本发明的方法制备的重组黑曲霉葡萄糖氧化酶具有很好的热稳定性和较好的酸碱耐受性,发酵工艺简单,不需转接,原料廉价易得,成本大大降低,可广泛应用于食品医疗领域中.
本发明公开了一种脱卤酶DhmB及其编码基因与应用.本发明的脱卤酶DhmB是如下a)或b)的蛋白质:a)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质;b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与脱卤相关的蛋白质.本发明的脱卤酶DhmB易纯化、稳定性好、耐受中高温、最适温度65℃、耐受有机溶剂且能降解低碳链的有机卤素化合物、经典农药及化学毒剂等,具有广阔的工业应用前景.
董志扬 董亮 戴欣 张山 王丽 张岩峰
2015-06-10
本发明公开了高通量筛选高效表达外源蛋白的重组里氏木霉的方法.该高通量筛选高效表达外源蛋白的重组里氏木霉的方法包括如下步骤:比较经流式细胞仪鉴定的表达外源蛋白的重组里氏木霉的红色荧光强度,根据红色荧光强度的高低鉴定外源蛋白的表达能力,红色荧光强度越高的表达外源蛋白的重组里氏木霉的外源蛋白表达能力越高.其中的外源蛋白基因以融合基因的形式导入里氏木霉,该融合基因是将红色荧光蛋白基因通过连接肽2A序列与外源蛋白基因连接得到的融合基因,所述外源蛋白基因位于所述红色荧光蛋白基因的上游或下游;所述外源蛋白基因的5′端具有信号肽序列;所述连接肽2A序列编码序列表中序列8的第290-306位所示的连接肽2A.
董志扬 秦丽娜
2013-01-16
生物化学,酶工程
非线性力学国家重点实验室
酶工程,多糖生物化学
山东大学(威海)海洋学院海洋生物工程系
酶工程,基因工程
中国农业科学院生物技术研究所
酶工程,蛋白质工程
酶工程
北京化工大学生命科学与技术学院生物工程系
制药工程,酶工程
南京工业大学生物与制药工程学院
山东大学生命科学学院
湖北大学生命科学学院
合肥工业大学医学工程学院