:陈坚(1962-),男,江苏无锡人,工学博士,教授,博士研究生导师,主要从事酶技术、发酵过程优化与控制研究.E-mail: jchen@jiangnan.edu.cn984年获清华大学环境工程专业学士学位;1986年、1990年先后获无锡轻工业学院发酵工程专业硕士、博士学位;2005年起,担任江南大学校长、党委常委;2017年至今,担任江南大学校长、党委副书记。
本发明公开了一种提高N‑乙酰神经氨酸产量的枯草芽孢杆菌,属于遗传工程领域.本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168ΔnagP ΔnagP ΔgamP ΔgamA ΔnagA ΔnagB Δ1dh Δpta::lox72;Δctc::p43‑Gna1,pP43NMK‑AGE‑NeuB)作为表达宿主,通过敲除磷酸转移酶系统葡萄糖特异性酶EIICBA组件ptsG,增加N‑乙酰神经氨酸合成途径中磷酸烯醇式丙酮酸的供给,加强合成途径,本发明的重组枯草芽孢杆菌与出发菌株相比,其N‑乙酰神经氨酸产量从190mg/L提高到660mg/L,为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础.
陈坚 堵国成 刘延峰 张晓龙
江南大学
2017-07-07
本发明公开了一种积累N‑乙酰神经氨酸重组枯草芽孢杆菌及其应用,属于遗传工程领域.本发明是以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168ΔnagP ΔnagP ΔgamP ΔgamA ΔnagA ΔnagB Δ1dh Δpta::lox72)作为表达宿主,通过过量共表达来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae S288C)的氨基葡萄糖乙酰化酶编码基因GNA1,来源于念珠藻(Anabaena sp.CH1)的N‑乙酰氨基葡萄糖异构酶(AGE)和来源于大肠杆菌(Escherichia coli K1)的N‑乙酰神经氨酸合酶(NeuB),得到了积累N‑乙酰神经氨酸枯草芽孢杆菌基因工程菌,N‑乙酰神经氨酸产量达到190mg/L,为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础.
本发明公开了一种热稳定性提高的肌酸水解酶突变体,属于酶工程领域,所述突变体是对肌酸水解酶氨基酸序列的第368位氨基酸进行突变.所述肌酸水解酶来源于大肠杆菌.所述突变体是将第368位的缬氨酸突变为蛋氨酸,得到突变体V368M.所述突变是对来源于大肠杆菌的肌酸水解酶蛋白质内部氨基酸进行定点突变,从而提高了肌酸酶的热稳定性.相对于现有的突变体V368M的半衰期提高了5倍,其Tm值提高了3℃.
陈坚 刘松 阮洁 冯岳 李江华 陈双全 邱芳芳 王晨蕾
2016-01-27
本发明公开了一种转化生产α-苯丙酮酸效率提高的重组菌,属于生物技术领域.本发明成功实现了大肠杆菌内aspC、tyrB和ilvE基因的敲除,从而阻断了细胞对产物PPA的降解,进一步提高了胞外转化L-苯丙氨酸的产量,PPA的产量可达3.9g/L.此全细胞转化体系的建立,解决了化学法合成PPA的步骤繁琐、得率低、污染环境等问题及酶法转化生产PPA的转化率低的问题,实现了无污染、高产率、一步法生产PPA,为后续工业化生产奠定了一定的理论基础.
陈坚 刘龙 李江华 堵国成 侯颖 顾汉章 徐堃
江南大学%江苏汉光生物工程有限公司
2015-08-26
本发明公开了一种采用全细胞转化高效生产α-苯丙酮酸的方法,属于发酵工程领域.本发明对L-氨基酸脱氨酶进行了改造,获得活性提高的L-氨基酸脱氨酶突变体.以含有L-氨基酸脱氨酶突变体的重组菌全组细胞转化L-苯丙氨酸生产PPA,L-苯丙氨酸生产PPA的转化率显著提高.本发明建立的全细胞转化体系,解决了化学法合成PPA的步骤繁琐、得率低、污染环境等问题及酶法转化生产PPA的转化率低的问题,实现了无污染、高产率、一步法生产PPA,为后续工业化生产奠定了一定的理论基础.
2015-08-12
本发明公开了一种酸胁迫抗性提高的重组乳酸菌及其构建方法与应用,属于生物工程技术领域.本发明通过在乳酸乳球菌L.lactis NZ9000中过量表达了来源于干酪乳杆菌L.casei Zhang的argH基因,得到了一株酸胁迫抗性能力显著提高的重组乳酸乳球菌L.lactis NZ-argH.酸胁迫条件下,重组菌株相对于对照菌株的生物量提高了24%,pH4.1条件下4h存活率为对照的1.98倍.本发明还提供了一种提高酸胁迫抗性的方法,该方法具有良好的工业应用价值.
陈坚 张娟 张明阳 唐诗
2015-05-06
食品发酵与酿造技术
贵州茅台酒股份有限公司
食品发酵与酿造技术,食品生物技术
贵州大学
江苏洋河酒厂股份有限公司
中国科学院成都生物研究所