张惠文

本发明属于微生物制备技术领域,具体的说是一种芽孢杆菌的发酵培养方法.具体为,将菌种在培养基中于30-37℃下活化培养24-48小时,待长出单菌落后,转接至固体斜面培养基上,培养得到菌体,待用;将活化后的菌株制成菌悬液,而后按1-5%体积的接种量将芽孢杆菌菌悬液接种到摇瓶发酵培养基中,以200-300转/分钟的转速,30-37℃振荡培养15-24小时,即得摇瓶发酵培养液;将摇瓶发酵培养液按1%-5%体积接种量接入种子罐中,以0.8-1.5vvm的通气量通入无菌空气在30℃-37℃、搅拌速率200-300rpm、罐压0.03-0.05Mpa、发酵培养16-24小时,得种子培养液;按4%-5%体积的接种量将种子培养液接入发酵罐中,以0.8-1.5vvm的通气量通入无菌空气在30℃-37℃、搅拌速率200-300rpm、罐压0.05-0.1Mpa、发酵培养48小时,得到芽孢杆菌发酵液.本发明操作简单、成本低、能够大规模生产,菌种最高芽孢产量为7*10¹⁰CFU/mL.

张惠文 李旭 孙健 苏振成 李新宇

中国科学院沈阳应用生态研究所

2015-09-23

本发明涉及农业生物技术领域的生物菌剂,具体的说是一种抑制植物病虫害的微生物菌剂及其制备方法和应用.菌株由载体、菌体、保护剂以及增效剂构成,按重量百分比计,微生物菌剂成分为:1~3%芽孢杆菌、2~4%链霉菌、30~50%草碳土、25~40%硅藻土、1~5%海藻酸钠、1~5%几丁质、5~10%糊精、2~6%磷酸二氢钾、0.8~1.5%硫酸镁和2~6%氯化钠.本发明菌剂主要用于作物土传真菌病害及根结线虫病害的生物防治.该菌剂制备工艺简单,防治效果持久,使用安全,对环境无污染.

张惠文 李旭 孙健 苏振成 李新宇

中国科学院沈阳应用生态研究所

2014-12-31

本发明涉及谷胱甘肽的生产工艺,具体的说一种从酵母菌体中纯化还原型谷胱甘肽的方法.将酿酒酵母菌泥经酸性热水抽提离心,收集上清液调节pH至酸性后经阳离子交换树脂纯化,并以可挥发性铵盐或可挥发性无机酸溶液进行洗脱,洗脱组分再经凝胶柱纯化洗脱,洗脱组分即为还原型谷胱甘肽.本发明采用合理的抽提条件,使谷胱甘肽最大程度地从细胞中溶解出来,并使谷胱甘肽在高温条件下的损失达到最低.抽提液与谷胱甘肽溶液在酸性条件下处于水溶液中最稳定的状态,同时可去除部分杂质.在谷胱甘肽的溶液与纯化设备中充入惰性气体,避免谷胱甘肽与空气中的氧接触,防止谷胱甘肽氧化.该方法步骤少,成本低,谷胱甘肽的得率与纯度较高,实现工业化生产.

张惠文 王硕 徐明恺 张成刚 苏振成

中国科学院沈阳应用生态研究所

2014-07-16

本发明涉及酶活力检测技术领域,具体地说是一种有机磷农药降解酶活力检测方法.该检测方法以目前广泛使用的有机磷农药毒死蜱作为酶促反应底物,加入吐温80作为分散剂,检测酶促反应体系中毒死蜱在291nm波长下的吸光度变化值,对照毒死蜱标准曲线,计算酶活力.该检测方法能够快速、灵敏地检测有机磷农药降解酶活力,为有机磷农药降解酶活力的检测及毒死蜱降解率的测定提供了一种有效的方法.

张惠文 谢建飞 徐明恺 张成刚 石元亮 卢宗云

中国科学院沈阳应用生态研究所

2014-01-08

本发明涉及通过基因工程改造得到的有机磷农药降解酶.本发明所述的一种随机突变改造的有机磷农药降解酶,它是通过取代来源于施氏假单胞菌的有机磷农药降解酶的1个氨基酸位点而产生的,所述的氨基酸取代位点是位于第71位的取代.本发明所述的有机磷农药降解酶不但对毒死蜱和甲基对硫磷的降解活性更加优秀,而且还具有优秀的热稳定性.

张惠文 谢建飞 徐明恺 张成刚 石元亮 卢宗云

中国科学院沈阳应用生态研究所

2013-06-12

本发明涉及生物农药技术领域,具体的说是一种微生物菌剂及其制备方法和应用.所述菌剂由灰色链霉菌(Streptomyces griseus)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)组成;所述灰色链霉菌(Streptomyces griseus)KJA04-02,已于2010年9月28日保藏在中国培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC M 2010253;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)KJB04-11,已于2010年9月28日保藏在中国培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC M2010254.本发明的菌剂高效、无毒、环境友好且制备工艺简单,该菌剂对大豆根腐病及大豆胞囊线虫都具有很好的防治效果,可用大豆根腐病及胞囊线虫病的生物防治.

张惠文 李旭 张成刚 苏振成 李新宇 徐明凯

中国科学院沈阳应用生态研究所

2013-06-05