通过野生型家蚕核多角体病毒中国镇江株BmNPV ZJ8基因组与修饰型苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒AcNPV BacPAK6基因组在家蚕细胞内同源重组,构建成重组救活可线性化修饰型家蚕核多角体病毒基因工程载体BmBacPAK.BmBacPAK含有LacZ基因和两个Bsu36I酶切位点用于线性化.BmBacPAK用作外源基因表达重组救活病毒筛出率几近100%.BmBacPAK用作载体表达人EPO基因,感染家蚕虫体和家蚕蛹时,EPO表达量达7.4*104U/ml血淋巴.
发明专利
CN98110963.2
1998.07.17
CN1242428
2000-01-26
吴祥甫 杨冠珍 胡建新
中国科学院上海生物化学研究所
C12N15/86,C,C12,C12N,C12N15
C12N15/86,C,C12,C12N,C12N15
1.一种保藏登记号为 CGMCC 0328的重组救活可线性化修饰型家蚕核多角体病毒BmBacPAK基因工程载体,其特征在于它是一个含苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcNPV)基因组部分片段的杂合型家蚕病毒,是一个双链DNA病毒,长度为130kb,其基因组主体部分为野生型家蚕核多角体病毒基因组,还含有来自于AcNPV的 BacPAK6修饰型病毒载体的多角体蛋白基因(Ph)启动子;LacZ报导基因;部分ORF1629复制必需基因;Ph5'''',3''''旁侧序列基因片段及人工引入的两个Bsu36I酶切位点.