本发明公开了一种利用锑微电极测定植物碳酸酐酶活力的电化学方法,其过程为:第一,制作锑微电极;第二,将预冷(0~2℃)的饱和CO2的蒸馏水加入到有碳酸酐酶的巴比妥缓冲体系和无碳酸酐酶的巴比妥缓冲体系;第三,将电化学工作站与锑微电极及参比电极相连,采用开路电位法分别对上述两个体系的整个反应过程进行监测,分别记录下有碳酸酐酶和无碳酸酐酶的反应体系中整个反应过程的电位值的变化,保存电位变化过程曲线;第四,依据电位变化过程曲线图选择起始段匀速部分,分别计算出两个体系中相当于一个pH单位的电位值变化所需时间,再根据这两种体系下降一个pH单位的所需时间计算酶活力.本发明比传统的pH计法精确度高,碳酸酐酶活力测定范围大.
发明专利
CN200910312517.3
2009.12.29
CN101793860A
2010-08-04
吴沿友 施倩倩 王坤 李萍萍 朱咏莉 宋艳娇
中国科学院地球化学研究所%江苏大学
G01N27/30(2006.01)I
一种利用锑微电极测定植物碳酸酐酶活力的电化学方法,其特征在于:它包括以下过程:第一,制作锑微电极;第二,将预冷(0~2℃)的饱和CO2的蒸馏水加入到有碳酸酐酶的巴比妥缓冲体系和无碳酸酐酶的巴比妥缓冲体系;第三,将电化学工作站与锑微电极及参比电极相连,采用开路电位法分别对上述两个体系的整个反应过程进行监测,分别记录下有碳酸酐酶和无碳酸酐酶的反应体系中整个反应过程的电位值的变化,保存电位变化过程曲线;第四,依据电位变化过程曲线图选择起始段匀速部分,分别计算出两个体系中相当于一个pH单位的电位值变化所需时间,再根据这两种体系下降一个pH单位的所需时间计算酶活力.