一种快速检测肿瘤相关小肽MUC1的方法

• 摘要：

  本发明公开了一种快速检测肿瘤相关小肽MUC1的方法,涉及荧光探针检测技术领域.利用适配体与目标小肽特异性识别的特点,设计特殊适配体序列,从而达到目标物特异性识别的目的;通过结合两种发卡结构探针的杂交反应完成信号放大的策略,从而实现目标小肽的灵敏检测.本方法包括探针预变性‑混合反应‑背景猝灭‑荧光检测等四个步骤,操作简便快速,省时省力,为肿瘤相关小肽MUC1的检测提供一种新的方法.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201610184950.3

• 申请日期：

  2016.03.29

• 公开/公告号：

  CN105784658A

• 公开/公告日：

  2016-07-20

• 发明人：

  于京华 马超 刘海云 颜梅 葛慎光 张彦 李丽 田甜

• 申请人：

  济南大学

• 主分类号：

  G01N21/64(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N21

• 分类号：

  G01N21/64(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N21,G01N21/64

• 主权项：

  一种快速检测肿瘤相关小肽MUC1的方法,其特征是包括以下步骤:(1)探针预变性首先,羧基荧光素FAM标记的发卡探针1和发卡探针2以及适配体,英文名称为aptamer,在95 ºC下分别孵育0.5 h;将这三种溶液在室温条件下放置1 h;(2)混合反应以下步骤进行的总反应混合液体积为200 µL,不同浓度的粘蛋白MUC1与一定浓度的发卡探针1和发卡探针2以及浓度为5 nM的适配体混合于缓冲溶液中,混合溶液在25 ºC下反应1 h;缓冲溶液的成分为浓度为0.75 M的氯化钠和50 mM的磷酸氢二钠,pH值为7.4;(3)背景猝灭向(2)所述步骤中得到的混合溶液加入浓度为0.5 mg/mL氧化石墨烯溶液,室温下孵育0.5 h;(4)荧光检测荧光检测的实验参数如下:激发波长为480 nm,发射波长范围为500‑650 nm.