牛乳头状瘤病毒13型抗体的间接ELISA检测方法

• 摘要：

  本发明公开了一种牛乳头状瘤病毒13型抗体的间接ELISA检测方法,步骤包括:步骤1、构建重组表达质粒pET28a??L1,以BPV13基因组为模板,针对BPV13衣壳蛋白L1基因序列设计特异性引物;通过PCR反应得到目的片段,对原核表达载体pET28a和目的片段同时双酶切,连接后得到重组表达质粒pET28a??L1;步骤2、对目的蛋白进行表达及纯化;步骤3、建立BPV13抗体的间接ELISA检测体系,针对BPV13L1蛋白样本阴阳性临界值,进行判定.本发明的方法,步骤简单,准确率高.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201610673256.8

• 申请日期：

  2016.08.16

• 公开/公告号：

  CN106290866A

• 公开/公告日：

  2017-01-04

• 发明人：

  王凤阳 杜丽 赵天靖

• 申请人：

  海南大学

• 主分类号：

  G01N33/569(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N33

• 分类号：

  G01N33/569(2006.01)I,C12N15/37(2006.01)I,C12N15/70(2006.01)I,G,C,G01,C12,G01N,C12N,G01N33,C12N15,G01N33/569,C12N15/37,C12N15/70

• 主权项：

  一种牛乳头状瘤病毒13型抗体的间接ELISA检测方法,其特征在于,按照以下步骤实施:步骤1、构建重组表达质粒pET28a??L1以BPV13基因组为模板,针对BPV13衣壳蛋白L1基因序列设计特异性引物;通过PCR反应得到目的片段,对原核表达载体pET28a和目的片段同时双酶切,连接后得到重组表达质粒pET28a??L1;步骤2、对目的蛋白进行表达及纯化;步骤3、建立BPV13抗体的间接ELISA检测体系,针对BPV13L1蛋白样本阴阳性临界值,进行判定,得到最终的检测结果.