本发明涉及基因工程技术领域,具体地,本发明涉及一种恒温条件下合成核酸的方法.本发明包括以下步骤:1)提供一种核酸,所述核酸的3'末端具有与同一条链上的F1c区退火的F1r区,并且通过所述F1r区与Flc区的同时退火可形成螺旋环;2)以步骤1)所述核酸为模板合成其自身的互补链;3)通过聚合酶催化链置换型互补链合成反应而进行互补链合成,以置换步骤2)中所合成的互补链.本发明所述寡核苷酸在引物的5'‑侧所提供的核苷酸序列,基本上与以该引物为合成起点而合成的区域相同.本发明在单纯试剂的组成上实现了基于恒温反应的核酸合成.
发明专利
CN201710031322.6
2017.01.17
CN106636071A
2017-05-10
杜昱光 毛瑞 刘洪涛 王倬
中国科学院过程工程研究所
C12N15/10(2006.01)I,C,C12,C12N,C12N15
C12N15/10(2006.01)I,C12Q1/68(2006.01)I,C,C12,C12N,C12Q,C12N15,C12Q1,C12N15/10,C12Q1/68
一种恒温条件下合成核酸的方法,包括以下步骤:1)提供一种核酸,所述核酸的3'末端具有与同一条链上的F1c区退火的F1r区,并且通过所述F1r区与Flc区的同时退火形成螺旋环;2)以步骤1)所述核酸为模板合成其自身的互补链,所述互补链的R1rc区与R1区退火,而Flc区退火的F1r区的3'末端组成螺旋环,作为合成起点;3)通过聚合酶催化链置换型互补链合成反应而进行互补链合成,以置换步骤2)中所合成的互补链,其中所述多核苷酸在其3'末端包含一种与步骤2)中合成的互补链的任意区域互补的序列.