一种乙型肝炎病毒基因组DNA的5‑乙炔基‑2'脱氧尿嘧啶核苷的标记和检测方法

• 摘要：

  本发明公开了一种乙型肝炎病毒基因组DNA的5‑乙炔基‑2'脱氧尿嘧啶核苷的标记和检测方法,具体的包括:(1)扩增NTCP基因,构建NTCP真核表达质粒pcDNA‑NTCP,将pcDNA‑NTCP转入Huh7肝癌细胞中构建NTCP稳定表达的Huh7‑NTCP细胞系;(2)使用EdU处理HepG2.2.15细胞,获取含EdU‑HBV的细胞上清,使用PEG8000处理,浓缩后进行HBV基因组拷贝数定量;(3)将HBV细胞传代培养至细胞汇合度为50‑80％时,使用EdU‑HBV感染Huh7‑NTCP细胞,然后进行EdU‑HBV荧光检测.本发明与现有技术相比,操作简单,图像结果无需进行后期处理,且各染色结果互不干扰.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201710153469.2

• 申请日期：

  2017.03.15

• 公开/公告号：

  CN106929484A

• 公开/公告日：

  2017-07-07

• 发明人：

  马春红 武专昌 梁晓红 高立芬 王泽华 宋晓佳 徐蕾琪 王体潇 宋洋 杜宪红 谭思雨

• 申请人：

  山东大学

• 主分类号：

  C12N7/01(2006.01)I,C,C12,C12N,C12N7

• 分类号：

  C12N7/01(2006.01)I,C12Q1/70(2006.01)I,G01N33/569(2006.01)I,C12R1/93(2006.01)N,C,G,C12,G01,C12N,C12Q,G01N,C12R,C12N7,C12Q1,G01N33,C12R1,C12N7/01,C12Q1/70,G01N33/569,C12R1/93

• 主权项：

  5‑乙炔基‑2'脱氧尿嘧啶核苷在对HBV基因组DNA进行标记和检测的应用.