一种无血清、无饲养层的多能干细胞培养方法

• 摘要：

  本发明涉及一种无血清、无饲养层培养多能干细胞的新方法,该方法稳定、可靠,能长期培养且维持多能干细胞的自我更新.本发明应用无血清无饲养层化学成分明确的培养体系对多能干细胞进行悬浮培养.培养15代后的干细胞的形态学、多能性标志分子的mRNA和蛋白表达,以及细胞染色质核型分析均表明,该类新培养体系能在长期培养过程中维持多能干细胞的特性.此外,本发明还通过体外拟胚体形成实验和体内畸胎瘤形成实验进一步验证了经15代悬浮培养后多能干细胞的分化潜能.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201310511821.7

• 申请日期：

  2013.10.25

• 公开/公告号：

  CN103555661A

• 公开/公告日：

  2014-02-05

• 发明人：

  段恩奎 雷晓华 邓智利

• 申请人：

  中国科学院动物研究所

• 主分类号：

  C12N5/0735(2010.01)I,C,C12,C12N,C12N5

• 分类号：

  C12N5/0735(2010.01)I,C,C12,C12N,C12N5,C12N5/0735

• 主权项：

  一种多能干细胞培养基,所述培养基为无血清、无饲养层的培养基,其特征在于,所述多能干细胞培养基包括100?2000单位/毫升的白血病抑制因子(LIF),优选地,所述培养基包括按1:1的体积比混合的DMEM/F12基础培养基和Neurobasal基础培养基,以及体积百分比为所述培养基的1~2%的N2添加剂、体积百分比为所述培养基的1~2%的无维生素A添加的B27添加剂、以及100?2000单位/毫升的白血病抑制因子(LIF);优选地,所述白血病抑制因子为1000单位/毫升.