一种重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用

• 摘要：

  本发明公开了一种重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的制备方法及其应用.将本发明的Pgod基因导入里氏木霉Tu6△tku70中构建的重组里氏木霉Tu6△tku70::Pgod能够成功地表达重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶,而且表达量较高,发酵液中的酶活力可达到28U/mL;将发酵液中的重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶通过镍柱纯化,超滤浓缩得到的蛋白溶液中的酶活力可达到330U/mL,重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶的比活力为407U/mg蛋白.采用本发明的方法制备的重组尼崎青霉葡萄糖氧化酶具有很好的热稳定性和较好的酸碱耐受性,发酵工艺简单,不需转接,原料廉价易得,成本大大降低,可广泛应用于食品医疗领域中.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201510115563.X

• 申请日期：

  2015.03.17

• 公开/公告号：

  CN104711274A

• 公开/公告日：

  2015-06-17

• 发明人：

  董志扬 马枝枝 陈秀珍 林洁 黄振邦 秦丽娜

• 申请人：

  中国科学院微生物研究所

• 主分类号：

  C12N15/53(2006.01)I,C,C12,C12N,C12N15

• 分类号：

  C12N15/53(2006.01)I,C12N9/04(2006.01)I,C12N15/80(2006.01)I,C12N1/15(2006.01)I,C12R1/885(2006.01)N,C,C12,C12N,C12R,C12N15,C12N9,C12N1,C12R1,C12N15/53,C12N9/04,C12N15/80,C12N1/15,C12R1/885

• 主权项：

  核酸分子,是Pgod基因或RNA分子,所述Pgod基因为如下a)‑f)中任一所述的DNA分子或cDNA分子:a)其编码序列是SEQ ID No.1的第4682‑6568位的DNA分子或cDNA分子;b)其编码序列是SEQ ID No.1的第4733‑6568位的DNA分子或cDNA分子;c)其编码序列是SEQ ID No.2的DNA分子或cDNA分子;d)其编码序列是SEQ ID No.2的第52‑1869位的DNA分子或cDNA分子;e)与a)或b)或c)或d)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性,且与a)或b)或c)或d)限定的核苷酸序列具有相同功能的cDNA分子或基因组DNA分子;f)在严格条件下与a)或b)或c)或d)限定的核苷酸序列杂交,且与a)或b)或c)或d)具有相同功能的cDNA分子或基因组DNA分子;所述RNA分子为如下g)‑j)中任一所述的RNA分子:g)其编码序列是将SEQ ID No.1的第4682‑6568位中的T均替换为U,其它核苷酸不变得到的RNA分子;h)其编码序列是将SEQ ID No.1的第4733‑6568位中的T均替换为U,其它核苷酸不变得到的RNA分子;i)其编码序列是将SEQ ID No.2中的T均替换为U,其它核苷酸不变得到的RNA分子;j)其编码序列是将SEQ ID No.2的第52‑1869位中的T均替换为U,其它核苷酸不变得到的RNA分子.