本发明公开了葡萄糖氧化酶优化基因及其表达载体和应用.本发明将黑曲霉来源的葡萄糖氧化酶基因在不改变蛋白质氨基酸序列的前提下,采用包括密码子使用频率,不同基因区域GC含量的分布,密码子适应指数CAI,mRNA结构优化,5'mRNA自由能优化,不稳定序列的删除等多策略方式进行优化;毕赤酵母表达结果发现,优化后的AGOD‑m3以及AGOD‑m5这两条基因能够提高酶蛋白在毕赤酵母中的分泌表达量,其中,AGOD‑m3在毕赤酵母中的分泌表达量提高尤为显著、酶活力也最强.本发明进一步提供了含有所述优化基因的重组表达载体及其在制备葡萄糖氧化酶中的应用.本发明为葡萄糖氧化酶的大规模工业化生产奠定了基础.
发明专利
CN201811304241.X
2018.11.03
CN109321586A
2019-02-12
张宇宏 张伟 张艳丽
中国农业科学院生物技术研究所
C12N15/53(2006.01)I,C,C12,C12N,C12N15
C12N15/53(2006.01)I,C12N15/81(2006.01)I,C12N1/19(2006.01)I,C12R1/84(2006.01)N,C,C12,C12N,C12R,C12N15,C12N1,C12R1,C12N15/53,C12N15/81,C12N1/19,C12R1/84
1.葡萄糖氧化酶优化基因,其特征在于,其核苷酸序列为SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示.