利用短单链DNA检测水体中三价砷的方法

• 摘要：

  一种利用短单链DNA检测水体中As(III)的方法,利用短单链DNA检测水体中As(III)的方法,通过单链DNA吸附至纳米金颗粒的表面以阻碍氯化钠诱导的纳米金聚集,使得检测液呈红色;当溶液中存在As(III)时,单链DNA首先与As(III)发生特异性结合的同时氯化钠诱导纳米金聚集,使得检测液呈蓝色,实现快速定性定量检测.本发明具有较高的灵敏度和较好的选择性,最低检测限为0.12ppb,操作简单,检测快速,可用于水中As(III)的检测.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201911028031.7

• 申请日期：

  2019.10.28

• 公开/公告号：

  CN110646419A

• 公开/公告日：

  2020-01-03

• 发明人：

  周培 张东伟 詹学佳 刘阳 丁济娜 卡希夫·哈雅特 俞明磊 戚志萍 张丹

• 申请人：

  上海交通大学

• 主分类号：

  G01N21/78(2006.01),G,G01,G01N,G01N21

• 分类号：

  G01N21/78(2006.01),G01N21/31(2006.01),G01N33/18(2006.01),G,G01,G01N,G01N21,G01N33,G01N21/78,G01N21/31,G01N33/18

• 主权项：

  1.一种利用短单链DNA检测水体中As(III)的方法,其特征在于,通过单链DNA吸附至纳米金颗粒的表面以阻碍氯化钠诱导的纳米金聚集,使得检测液呈红色;当溶液中存在As(III)时,单链DNA首先与As(III)发生特异性结合的同时氯化钠诱导纳米金聚集,使得检测液呈蓝色,实现快速定性定量检测; 所述的单链DNA如Seq ID No.1所示,具体为5'-TCGAGATAGTAAGTGCAATCT-3',其选择性地或与As(III)特异性结合或吸附在纳米金表面保护纳米金不被氯化钠聚集; 所述的线性关系,即回归方程为A650/A520＝5.1*10-3CAs(III)+0.5171,方程中:A650/A520为反应液在520nm和650nm波长下的吸光度值的比值,CAs(III)为As(III)的浓度. 2.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的检测液,具体通过以下方式配置:向1.5mL的离心管中分别加入16μL初始浓度为1μM的单链DNA溶液和244μL MOPs缓冲液. 3.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的定性定量检测是指:当引入As(III)及浓度梯度的变化时,使得纳米金颗粒聚集程度发生改变并在650nm和520nm处的吸光度发生变化. 4.根据权利要求3所述的方法,其特征是,根据比色信号的变化与加入As(III)的浓度的线性关系对未知浓度的水体进行精确快速检测. 5.根据权利要求3所述的方法,其特征是,所述的浓度梯度的变化是指:As(III)的浓度为1-250ppb. 6.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述的定性定量检测具体是指:向1.5mL的离心管中分别加入10μL不同浓度的As(III)标准溶液,使得整个检测体系中的As(III)的浓度为1-250ppb,充分混匀后置于25℃的孵育器中孵育15分钟;再分别加入200μL纳米金溶液,混匀后在25℃的孵育器中孵育10分钟,最后向反应体系中加入30μL氯化钠溶液,混匀后在25℃的条件下孵育5分钟. 7.根据权利要求6所述的方法,其特征是,所述的比色信号的变化是指:分别取200μL含有As(III)和纳米金溶液的反应液置于96孔板中,并将孔板放在酶标仪中测定其在520nm和650nm波长下的吸光度值,并以As(III)浓度与其对应的吸光度的比值A650/A520作图,绘制标准曲线.