一种类肽纳米片层、其制备方法及应用

• 摘要：

  本发明提供了一种类肽纳米片层,所述纳米片层包含,如式I所示的类肽,还提供了该类肽及其纳米片层的制备方法和应用.本发明的类肽可以通过采用表面等离激元共振成像技术检测阿尔兹海默症,具有高通量、灵敏度高的优点,而且芯片可以重复利用所以成本低.另外,本发明直接检测血液中的多肽含量,不会给病人造成创伤.本发明涉及具有特定功能的纳米片层的合成以及对阿尔兹海默症的检测.因目前缺乏对阿尔兹海默症早期的有效检测手段,利用本发明可以有效地实现对阿尔兹海默症的早期检测,进而展开治疗并延缓病情的恶化.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201810910741.1

• 申请日期：

  2018.08.10

• 公开/公告号：

  CN110818777A

• 公开/公告日：

  2020-02-21

• 发明人：

  杨延莲 高厚乾 朱凌 赵子健 胡志远 王琛

• 申请人：

  国家纳米科学中心

• 主分类号：

  C07K14/00(2006.01),C,C07,C07K,C07K14

• 分类号：

  C07K14/00(2006.01),C07K1/06(2006.01),C07K1/04(2006.01),G01N33/68(2006.01),C,G,C07,G01,C07K,G01N,C07K14,C07K1,G01N33,C07K14/00,C07K1/06,C07K1/04,G01N33/68

• 主权项：

  1.一种类肽纳米片层,其特征在于,所述纳米片层包含:如式I所示的类肽, 其中,所述n为3-7的正整数. 2.根据权利要求1所述的类肽纳米片层,其特征在于,所述纳米片层的片层厚度为1~10nm,优选为2~5nm. 3.根据权利要求1或2所述的类肽纳米片层的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤: (1)制备类肽母液:将类肽溶解到二甲基亚砜和水的混合溶液中制得类肽母液; (2)制备类肽溶液:将步骤(1)制备的类肽母液稀释到片层形成缓冲液中制得类肽溶液;和 (3)摇晃步骤(2)制备的类肽溶液,得到所述类肽纳米片层溶液. 4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述类肽通过固相亚单元合成法制备,包括以下步骤: (a)将溴乙酸和N,N'-二异丙基碳二亚胺加入Rink amide AM树脂进行反应,将树脂末端的氨基酰化; (b)加入伯胺进行反应,完成一个亚单位的合成; (c)重复步骤(a)和(b)直至完成其余单位的合成;和 (d)合成完毕后,侧链保护基团被除去,并用三氟乙酸、超纯水、三异丙基硅烷混合溶液将类肽从树脂上裂解. 5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于: 所述步骤(1)中,反应温度为37℃,反应时间为10~60min,优选为20~40min,最优选为30min; 所述步骤(2)中,所述伯胺选自以下一种或多种:1,4丁二胺、β-苯乙胺、乙二胺、异丁胺、甲基苄胺、胡椒基胺、联苯乙胺;优选为1,4丁二胺、β-苯乙胺、乙二胺、异丁胺,胡椒基胺、联苯乙胺;更优选为1,4丁二胺、β-苯乙胺、异丁胺;最优选为β-苯乙胺;和/或 所述步骤(4)中,所述混合溶液中体积比为95％三氟乙酸,2.5％超纯水和2.5％三异丙基硅烷. 6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中: 所述混合溶液中二甲基亚砜和水的体积比为2:1;和/或 所述类肽母液的浓度为1~5mM,优选为1~3mM,最优选为2mM. 7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中: 所述片层形成缓冲液中包括4-羟乙基哌嗪乙磺酸和氯化钠; 优选地: 所述缓冲液中4-羟乙基哌嗪乙磺酸的浓度为5~20mM,进一步优选为8~15mM,最优选为10mM; 所述缓冲液中氯化钠的浓度为50~200mM,进一步优选为80~150mM,最优选为100mM;和/或 所述缓冲液的PH为8. 8.根据权利要求3至7中任一项所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,所述溶液的摇晃方法为手动摇晃法和/或机器摇晃法;其中: 所述手动摇晃法包括以下步骤:将类肽溶液在室温下稳定存放22小时,然后手动轻轻摇晃30秒,再稳定1分钟,重复摇晃-稳定过程5次;和/或 所述机器摇晃法包括以下步骤:将类肽溶液在管中自水平至垂直缓慢旋转,旋转速度为0.6rpm,每隔450秒旋转一次. 9.权利要求1或2所述的类肽纳米片层或根据权利要求3至8中任一项所述方法制备的类肽纳米片层在制备用于检测β-淀粉样多肽相关疾病的医疗产品中的应用;优选地,所述β-淀粉样多肽相关疾病为阿尔茨海默症. 10.一种用于检测β-淀粉样多肽的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括: 权利要求1或2所述的类肽纳米片层,和/或 根据权利要求3至8中任一项所述方法制备的类肽纳米片层.