一种组成型乳酸菌启动子、重组载体及其重组菌和应用

• 摘要：

  本发明提供了一种组成型乳酸菌启动子、重组载体及其重组菌和应用,属于基因工程领域.本发明提供的启动子PgapA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示.所述启动子PgapA能够启动下游基因在乳酸菌中的高效表达,蛋白表达活性显著高于传统诱导型PNisinA的表达活性,是一种超高效启动子.本发明的启动子PgapA与目标基因其所组成的蛋白表达框,表达载体以及宿主菌可以用于肽类和蛋白类药物的口服药物递送,不仅在基因工程中具有良好的应用前景,还可以提高患者的服药依从性,有望产生可观的社会和经济效益.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201910288779.4

• 申请日期：

  2019.04.11

• 公开/公告号：

  CN111518801A

• 公开/公告日：

  2020-08-11

• 发明人：

  金万洙

• 申请人：

  中国科学院动物研究所

• 主分类号：

  C12N15/113(2010.01),C,C12,C12N,C12N15

• 分类号：

  C12N15/113(2010.01),C12N15/63(2006.01),C12N1/21(2006.01),C12R1/01(2006.01),C12R1/225(2006.01),C12R1/46(2006.01),C,C12,C12N,C12R,C12N15,C12N1,C12R1,C12N15/113,C12N15/63,C12N1/21,C12R1/01,C12R1/225,C12R1/46

• 主权项：

  1.一种组成型乳酸菌启动子,其特征在于,所述启动子的核苷酸序列如序列表SEQ IDNo.1所示或为与序列表SEQ ID No.1所示的互补序列. 2.一种含有权利要求1所述启动子的重组载体. 3.根据权利要求2所述重组载体,其特征在于,所述重组载体中基础载体为pNZ8149; 所述重组载体还包括目标基因; 所述目标基因为编码人源PD-1/PD-L1信号通路的抑制剂的序列和编码抑制PD-1/PD-L1信号通路和TGFβ/TGFβR2信号通路抑制剂的序列. 4.根据权利要求3所述重组载体,其特征在于,所述编码人源PD-1/PD-L1信号通路的抑制剂的序列包括人源PD-1胞外域结构蛋白的核苷酸序列或编码包含人源PD-1胞外域结构蛋白的融合蛋白的序列; 所述人源PD-1胞外域结构蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示; 所述编码包含人源PD-1胞外域结构蛋白的融合蛋白的序列为编码人源PD-1胞外域-人源TGFβR2胞外域融合蛋白的序列. 5.根据权利要求3所述重组载体,其特征在于,所述编码抑制PD-1/PD-L1信号通路和TGFβ/TGFβR2信号通路抑制剂的序列为编码人源PD-1胞外域-人源TGFβR2胞外域融合蛋白的序列. 6.根据权利要求4或5所述重组载体,其特征在于,所述编码人源PD-1胞外域-人源TGFβR2胞外域融合蛋白的序列如SEQ ID No.3所示. 7.一种含有权利要求1所述启动子或权利要求2~6任意一项所述重组载体的重组细胞. 8.根据权利要求7所述重组细胞,其特征在于,所述重组细胞中基础细胞包括肠道正常菌; 所述肠道正常菌包括双歧杆菌属Bifidobacterium、乳杆菌属Lactobacillus或链球菌属Streptococcus. 9.权利要求1所述启动子、权利要求2~6任意一项所述重组载体或权利要求7或8所述重组细胞在表达目标基因或合成代谢产物中的应用. 10.权利要求1所述启动子、权利要求2~6任意一项所述重组载体或权利要求7或8所述重组细胞在制备蛋白质类或多肽类药物中的应用.