• 一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针及其合成方法与应用

    • 摘要:

      本发明公开了一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针及其合成方法与应用,其公开了一种在无背景信号检测基础上建立的新型丁酰胆碱酯酶传感策略,在丁酰胆碱酯酶的作用下,实现荧光信号从无到有的转变,进而检测丁酰胆碱酯酶的浓度水平.所述荧光探针通过将丁酰胆碱酯酶的靶向位点引入非发射骨架生成探针P1,避免了检测探针的固有荧光背景,极大地提高了检测灵敏度.在加入丁酰胆碱酯酶后,可以除去环丙基丁酸,进而自发的原位环化,生成荧光产物PF以作为反映BChE活性的指示剂.本发明不仅可以大幅提高检测灵敏度,还具有良好的选择性及生物相容性,在临床诊断领域具有很大的潜力.

    • 专利类型:

      发明专利

    • 申请/专利号:

      CN202010536167.5

    • 申请日期:

      2020.06.12

    • 公开/公告号:

      CN111592504A

    • 公开/公告日:

      2020-08-28

    • 发明人:

      丁彩凤 张倩 傅彩霞 滕葆晖 张鹏

    • 申请人:

      青岛科技大学

    • 主分类号:

      C07D277/64(2006.01),C,C07,C07D,C07D277

    • 分类号:

      C07D277/64(2006.01),C09K11/06(2006.01),G01N21/64(2006.01),C,G,C07,C09,G01,C07D,C09K,G01N,C07D277,C09K11,G01N21,C07D277/64,C09K11/06,G01N21/64

    • 主权项:

      1.一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针,其特征在于,所述荧光探针的结构式为: 2.一种如权利要求1所述的用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针的合成方法,其特征在于,具体包括如下步骤: (1)在0℃下,以无水二氯甲烷为反应介质,以4-(二乙氨基)-水杨醛和环丙烷甲酰氯为反应物,以三乙胺创造碱性环境,混合物在室温搅拌过夜,随后利用二氯甲烷和去离子水萃取分离,通过减压蒸馏除去溶剂,并将粗产物通过柱色谱法纯化,得到化合物1; (2)以无水乙醇为反应介质,以2-氨基苯硫醇和丙二腈为反应物,加入3-5滴乙酸创造酸性环境,室温下搅拌反应4~6h,萃取分离,经减压旋蒸得到化合物2; (3)以无水乙醇为反应介质,以步骤(1)制备的化合物1和步骤(2)制备的化合物2为反应物,加入哌啶作为催化剂,于60℃~90℃下回流4~8h,经减压旋蒸除去溶剂,并将残余物溶于乙酸乙酯,然后用稀盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤后通过硅胶柱色谱法纯化,得到所述用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针P1. 3.根据权利要求2所述的一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针的合成方法,其特征在于,所述步骤(1)中,4-(二乙氨基)-水杨醛、环丙烷甲酰氯与三乙胺的摩尔比为1:(1.2~1.5):(1.5~2.5). 4.根据权利要求2所述的一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针的合成方法,其特征在于,所述步骤(2)中,2-氨基苯硫醇和丙二腈的摩尔比为1:(1.2~2.5). 5.根据权利要求2所述的一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针的合成方法,其特征在于,所述步骤(3)中,化合物1、化合物2和哌啶的摩尔比为1:(1.2~1.5):(1.2~2.5). 6.一种如权利要求1所述的用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针或如权利要求2~5任一方法合成的荧光探针在溶剂体系中选择性识别丁酰胆碱酯酶的应用. 7.根据权利要求6所述的一种用于检测丁酰胆碱酯酶活性的荧光探针的应用,其特征在于,还包括所述荧光探针在以丁酰胆碱酯酶为标志物的检测及筛选丁酰胆碱酯酶抑制剂中的应用.