本发明蛙疱疹病毒1型的LAMP快速检测方法及试剂盒,属于农业科学生物技术应用领域.所述快速检测方法,包括下述步骤:(1)提取待测样本总的DNA核酸作为反应模板;(2)配置LAMP反应溶液,其中LAMP反应溶液由下列体积比的组分组成,Bst DNA聚合酶:水霉菌:灭菌水:2*反应缓冲液:引物混合物=1:2:8.6:12.5:0.9;(3)将步骤(1)提取的样本总DNA加入到步骤(2)配制的LAMP反应溶液中,混合;(4)在60℃恒温水浴中反应30分钟;(5)诊断结果:将步骤(4)扩增反应后产物用电泳检测或荧光染料技术进行鉴定.本方法具有操作简单、低成本,反应快速、特异性强、灵敏度高的优点,且用时短,灵敏度比普通PCR高100倍,对壶菌早期诊断准确性更高的特点.
发明专利
CN201410631647.4
2014.11.11
CN104293983A
2015-01-21
王晓龙 汪环
东北林业大学
C12Q1/70(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1
C12Q1/70(2006.01)I,C12Q1/68(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1,C12Q1/70,C12Q1/68
蛙疱疹病毒1型的LAMP快速检测方法,包括下述步骤:(1)、提取待测样本总DNA作为反应模板;(2)、配置LAMP反应溶液,其中LAMP反应溶液由Bst DNA聚合酶、水霉菌、灭菌水、2*反应缓冲液和引物混合物组成,体积比为:Bst DNA聚合酶:水霉菌:灭菌水:2*反应缓冲液:引物混合物=1:2:8.6:12.5:0.9;(3)、将步骤(1)提取的样本总DNA加入到步骤(2)配制的LAMP反应溶液中,混合;(4)、在60℃恒温水浴中反应30分钟;(5)、诊断结果:将步骤(4)扩增反应后产物用电泳检测或荧光染料技术进行鉴定,呈阳性的表示样本含有蛙疱疹病毒1型,呈阴性的表示样本不含有蛙疱疹病毒1型.