本发明涉及以对活化血小板具有高亲和力的Annexin V为载体构建血栓靶向性溶栓融合蛋白是Annexin V与低分子量尿激酶融合基因在昆虫细胞中的活性表达产物.将Annexin V与scu-PA-32K融合基因插入Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统的供体质粒中,将重组供体质粒转化钙细胞HB10B,并经蓝白斑筛选获取重组Bacmid,以脂质体法转染Sf21细胞而获得重组病毒BacUKAV.昆虫细胞Tn-5B1-4表达的Annexin V-scu-PA-32K融合蛋白不仅对活化血小板具有高亲和力,而且具有尿激酶的纤溶活性,为双功能蛋白.
发明专利
CN99113524.5
1999.03.12
CN1247195
2000-03-15
吴祥甫 孙建新 杨冠珍
中国科学院上海生物化学研究所
C07K19/00,C,C07,C07K,C07K19
C07K19/00,C,C07,C07K,C07K19
权利要求书1.一种血栓靶向性溶栓融合蛋白,其特征在于通过基因工程方法首先构建Annexin V与低分子量尿激酶scu-PA-32K的融合基因,将该融合基因插入Bac to Bac昆虫杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTa中得到重组供体质粒pFastBacUKAV,再将该重组供体质粒转化获得重组病毒BacUKAV,BacUKAV感染昆虫细胞表达获得Annexin V-scu-PA-32K融合蛋白.