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来源：BioArt
本免疫组化（IHC）综合指南将带您了解从组织处理、抗体选择到检测、对照和疑难解析的全部内容。
免疫组化（IHC）利用抗体检测组织切片中蛋白质和其他抗原的定位。抗体-抗原的相互作用通过有色酶底物显色检测或荧光染料荧光检测进行观察。
虽然 IHC 在定量方面不如蛋白质印迹或 ELISA，但是 IHC 可以提供完整组织中蛋白定位的宝贵信息。蛋白表达谱对病理学家以及作为诊断工具都具有重要意义。
IHC 实验成功的关键在于稳定、优化且可重复的染色方案，而该方案应使用优质的特异性试剂。
在本指南中，我们将为您介绍：
1
疫情组织处理、固定和切片快讯
组织固定可保存抗原，防止收获的组织自溶和坏死。包埋组织可在切片过程中提供支持，使切片更耐用。
2
抗原修复
对甲醛固定的组织切片进行抗原修复，以暴露抗原位点，从而使抗体结合。
3
阻断蛋白质
用血清或蛋白封闭，防止非特异性抗体结合，并减少背景和潜在的假阳性结果。
4
阻断内源性酶
使用酶检测方法，需阻断内源性酶，以免混淆您的结果。使用一抗孵育后，需考虑阻断内源性酶，因为像 H2O2 这样的处理会破坏抗原表位，影响结合。如果您的抗体是 HRP 一抗偶联物，那么在加入一抗之前，需要先完成阻断处理。
5
一抗
设计 IHC 实验的关键在于一抗的选择，因为免疫染色的成功需要借助与靶抗原特异性结合的一抗。
6
检测和扩增系统
对于间接检测，二抗是成功显示一抗分布的关键。
7
多色 IHC
使用多色免疫组化 (mIHC) 可在单个组织切片中对多种标记物进行免疫染色。
8
复染
对特定形态或结构进行复染，有助于一抗的定位。
9
IHC 的对照品
您可通过运行适当的对照品来确认染色模式的有效性，并排除实验伪影。
来源：BioGossip BioArt
原文链接：https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzA3MzQyNjY1MQ==&mid=2652487795&idx=2&sn=02f353e8026e5f90bc43f3a11c0470b3&chksm=84e253c7b395dad16f9c48fcb717dcd036bed1d0162f02ad2d895ed3fbf1ff9e61c5264aa77c#rd
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