MSI 检测：结直肠癌患者必检的基因检测项目

来源：医世象

MSI检测已被NCCN《结直肠癌临床实践指南》及CSCO《结直肠癌诊疗指南》推荐用于所有结直肠癌患者，MSI检测对于结直肠癌及子宫内膜癌在内的多种实体瘤患者均具有重要的临床意义。

34岁的王女士刚刚生下一枚可爱的宝宝，全家人还正沉浸在喜悦的气氛中。但是没过多久，王女士发现自己的腹部隐约的能摸到一个肿块。于是心事不宁的王女士在医生建议下做了一次B超诊断。

结果让王女士松了一口气，B超显示肿块为肠管，并且没有发现实质性的病变。然而，好景不长，2月过去了王女士腹部的肿块依然存在。略有隐忧的王女士来到医院又进行了检查。CT结果显示淋巴肿大，彩超也提示右中腹多发淋巴结肿大。

为了尽快查明病情，医生随后对王女士做了一次肠镜。诊断结果犹如晴天霹雳一般，王女士被确诊为回盲部高—中分化腺癌，也即结肠癌。

 CT增强扫描结果

王女士接受了肿瘤切除手术，但同时病理结果显示已经有了腹腔转移。在医生建议下，王女士进行了一次肿瘤微卫星不稳定性（MSI）检测。送检的病理切片结果显示王女士肿瘤部位基因存在微卫星高度不稳定，这就意味着进行免疫治疗预后较好且化疗不获益。

随后，主治医师对王女士采用了PD-1抑制剂免疫疗法，病情也逐步得到了控制。同时也避免了化疗给王女士肉体和精神上带来的摧残。

微卫星（Microsatellite, MS）是指细胞基因组中以少数几个核苷酸（通常为1-6个）为单位串联重复的DNA序列。当DNA错配修复（mismatchrepair, MMR）功能出现异常时，MS出现的复制错误得不到纠正并且不断积累使得其序列长度或碱基组成发生改变，变成了微卫星不稳定性（Microsatellite Instability, MSI）。

图2：MSI产生示意图

1993年，科研人员首次在结直肠癌中发现了这种现象。1997年，美国国家癌症研究所（NCI）在结直肠癌中制定了MSI的分级标准并推荐使用5种特定的标记物进行微卫星的分级。如果五个标记物中有两个或两个以上的序列长度发生变异，则为MSI高度不稳定（MSI-H），如果只有一个发生变异，则为MSI低度不稳定（MSI-L）。

虽然MSI-H现象最早发现于结直肠癌患者中，但是近20年的研究发现MSI-H在很多实体瘤中都存在。在子宫内膜癌、胃癌、肝癌、甲状腺癌、壶腹癌及皮肤癌（黑色素瘤）等患者中出现频率超过10%。

其他肿瘤，如卵巢癌、宫颈癌、食管腺癌、软组织瘤、头颈癌、肾癌及尤文肉瘤出现频率则在2%~10%之间。

但在鳞状细胞皮肤癌，基底细胞皮肤癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、骨肉瘤、胶质母细胞瘤、胰腺导管腺瘤、膀胱癌及睾丸生殖细胞癌等中，MSI-H出现频率低于2%。

图3：MSI-H在不同癌种中出现频率

“精准医疗”其目标就是精确寻找到疾病原因及其治疗靶点，并对一种疾病的不同状态和过程进行精确分类，最终实现对疾病和特定患者个性化精准治疗的目标，提高疾病预防与诊治的效益。

那么，在当前医疗水平条件下，有什么方法可以提高MSI-H癌症患者的治疗效果呢？

这就离不开诊+治两手策略。

2017年5月23日，FDA基于5项单臂研究（KN016/164/012/028/158）批准了帕博利珠单抗（Keytruda， K药）用于治疗在先前治疗后进展且没有令人满意替代治疗方案的 MSI-H 实体瘤患者以及氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康治疗后进展的 MSI-H结肠直肠癌患者。这标志着MSI-H成为首个泛实体瘤免疫治疗生物标志物。

2017年7月31日和2018年7月10日，FDA基于CM142研究分别批准纳武利尤单抗（Nivolumab，O药）单药及联合低剂量CTLA-4抑制剂伊匹木单抗（YERVOY，Y药）用于治疗氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康治疗后进展的 MSI-H/dMMR 结肠直肠癌患者。

在今年6月29日，FDA基于KN177研究批准K药单药用于不可切除或转移性MSI-H结直肠癌患者的一线治疗。

在诊断方面，CSCO《结直肠癌2020版指南推荐》中给出了答案。

即：建议采用NCI推荐的5个微卫星位点（BAT25，BAT26，D5S346，D2S123和D17S250），即Bethesda panel。所有5个位点均稳定为MSS（微卫星稳定），1个位点不稳定为MSI-L（微卫星低度不稳定），2个及2个以上位点不稳定为MSI-H（微卫星高度不稳定）。

此外，临床实践中一般都会默认MMR基因表达缺陷（dMMR）=高频微卫星不稳定性（MSI-H），MMR基因表达正常（pMMR）=低频微卫星不稳定性（MSH-L）或微卫星稳定（MSS），两者一致率高达到90%以上。

因此，也可以通过检测MMR蛋白缺失来反映MSI状态。

表1：MSI状态检测方法学比较

由于NGS检测通量高，灵敏度及特异性强，在NGS中加入MSI检测，能够一次性检测多个MSI位点。NGS无疑成了MSI检测的一个重要方法，这也是临床的迫切需求。

当然，所有基于NGS的MSI检测应用于临床前必须进行充分的可靠性认证及临床验证。目前，国内肿瘤基因检测市场已有不少公司可以提供NGS的MSI检测。以臻和科技为例，旗下三款基于NGS平台的检测方案均可以覆盖MSI检测。