“水产生物病害与防治”专栏——鲤疱疹病毒Ⅱ型主要免疫原性蛋白的鉴定学术资讯

来源：水产学报

“水产生物病害与防治”专栏

为加强我国从事水产动物病害基础和应用研究的科研及技术人员的交流，促进我国水产动物病害研究和防治水平的提高，保障我国水产业的持续健康发展，本刊特开设“水产生物病害与防治”专栏，为广大水产科技工作者提供交流的平台。

题目

鲤疱疹病毒Ⅱ型主要免疫原性蛋白的鉴定

作者

高娃 1 , 温虹 1 , 王浩 1,2,3 , 陆佳荃 1 , 吕利群 1,2,3 , 姜有声 1,2,3

单位

1. 上海海洋大学，国家水生动物病原库，上海 201306

2. 上海海洋大学，水产科学国家级实验教学示范中心，上海 201306

3. 上海海洋大学，水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心，上海 201306

摘要

为了鉴定CyHV-2的主要免疫原性蛋白，本研究用分离的CyHV-2-YC-1分离株感染异育银鲫尾鳍细胞系(GiCF)，用蔗糖密度梯度超速离心法对细胞感染液中的CyHV-2进行纯化，纯化后的CyHV-2病毒免疫小鼠制备抗CyHV-2多克隆抗体。纯化的病毒颗粒经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE)和考马斯亮蓝染色后，用抗CyHV-2多克隆抗体进行Western blotting分析和质谱鉴定。结果显示，透射电镜观察下发现50%~66%的蔗糖梯度多见完整囊膜包裹的CyHV-2病毒颗粒，也有少量囊膜破损的病毒颗粒。Western blotting结果显示，抗CyHV-2多克隆抗体与多种病毒蛋白具有特异性免疫反应，质谱鉴定显示，其中8种主要免疫原性蛋白分别是ORF92、ORF115、ORF25、ORF57、ORF66、ORF72、ORF131和ORF132。研究表明，通过蔗糖密度梯度超速离心法提纯CyHV-2病毒颗粒后，本研究制备的抗CyHV-2多克隆抗体能够特异性识别CyHV-2病毒的主要免疫原性蛋白。本研究将为CyHV-2免疫学检测方法的建立以及疫苗的研制提供更多的候选抗原。

关键词

鲤疱疹病毒Ⅱ型；免疫原性；蛋白；质谱鉴定

文中图片

CyHV-2蔗糖密度梯度超速离心纯化结果

纯化的CyHV-2病毒SDS-PAGE电泳结果(a)和Western blotting结果(b)

文章引用格式

高娃, 温虹 , 王浩，等.鲤疱疹病毒Ⅱ型主要免疫原性蛋白的鉴定[J].水产学报.DOI: 10.11964/jfc.20190611828.

Gao W, Wen H, Wang H, et al. Identification of major immunogenic proteins from Cyprinid Herpesvirus 2[J]. Journal of Fisheries of China. DOI: 10.11964/jfc.20190611828.

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