血涂片制作

血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法，应用极广。特别是对各种血液病的诊断有很大价值。血涂片制作包括玻片的制作和染色两个步骤。但血片制备和染色不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。例如，血膜过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘；染色良好的血片是血液学检查主要基本技术之一。1

基本原理将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层分布，制成薄血片。用瑞氏染液进行染色。细胞中的碱性物质，如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中的酸性物质，如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色；中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合，染成淡紫红色。1

载波片的要求制备血涂片使用的载玻片要有很好的清洁度。新的载玻片常有游离碱质，应用清洗液或10% 盐酸浸泡24小时，然后再彻底清洗。用过的载玻片可放入适量肥皂水或洗涤剂的水中煮沸20分钟，再用热水将肥皂和血膜洗去，用自来水反复冲洗，然后擦干备用。

操作步骤1、用毛细吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL，或者直接采集患者末梢血，将血滴滴至载玻片的一端约1CM处或整片的3/4端。有磨砂片的玻片，可在接近磨砂头的部位来水反复冲洗，然后擦干备用。

2、左手持载玻片，右手持玻片，将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并压在血滴上，使血液呈“￣”字型展开，充满推片宽度。

3、将推片与载玻片形成30度夹角，用均匀的速度将血向载玻片的另一端推动。红细胞压积发生变化时，应适当的调整推片与载玻片的角度以及推动血液是的速度。标准的血涂片应做到头、体、尾分明，两边和两端留有空隙。1

染色方法1、瑞氏-吉姆萨混合染色能集合瑞氏染色与吉姆萨染色的优点。

2、染色方法：标记血涂片，将血涂片平放在染色架上，滴加A液覆盖整个血膜，30秒-1分钟后，滴加B液，将A、B液混匀，可用洗耳球轻吹液面，A、B液的比例为1:2，静置水平位置染色5-10分钟后，将载玻片拿起，轻轻晃动，使染料不再附着于血膜上。把水流调至最小，平持载玻片，与水流方向呈90度，在血膜头部冲入，向血膜的尾端调整玻片的角度，直至染料冲干净，冲洗干净后的血涂片，放置在血片架上将水自然控干，或倾斜玻片等待自然干燥。

3、判断染色结果：在正常情况下，良好的染色结果为血膜外观为淡紫红色；低倍镜下，细胞分布均匀；细胞呈粉红色，少见染色颗粒，白细胞胞质能显示各类细胞的特有色彩，白细胞核染成紫红色。1

本词条内容贡献者为:

赵阳国 - 副教授 - 中国海洋大学