Nature Plants:首次揭示植物中的锌传感器

科技工作者之家 2021-02-17

来源:植物科学最前沿

锌是植物和动物必需的微量营养元素植物依靠一个严格调控的锌稳态网络来维持细胞内的锌水平,避免缺锌或毒害。

前期研究表明,bZIP19和bZIP23能与缺锌条件下激活的靶基因的启动子中的缺锌反应元件(ZincDeficiency Response Elements,ZDRE)结合。bZIP19和bZIP23的活性依赖于锌水平,在锌充足时其蛋白活性被抑制。由此,产生了一个理论模型:bZIP19和bZIP23的锌依赖活性可以通过锌与它们富含半胱氨酸Cys/组氨酸His的基序直接结合而被锌离子调节。但在植物中,锌感应机制仍缺乏证据。

2021年2月16日,NaturePlants 在线发表了丹麦哥本哈根大学科学家的题为Arabidopsis bZIP19 and bZIP23 act as zincsensors to control plant zinc status 的研究论文,本研究通过体内和体外实验揭示,转录因子bZIP19和bZIP23是Zn缺乏反应的中枢调控因子,它们通过结合Zn2+与其富含Cys/His的基序来发挥Zn传感器的作用。

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本研究中,为了检测富含Cys/His基序的bZIP19和bZIP23是否能与锌结合,作者用bZIP19和bZIP23天然蛋白和一个缺失了两个Cys/His富含基序的bZIP19(del1del2)蛋白进行了体外锌蛋白结合实验。表明锌与bZIP19蛋白和bZIP23蛋白结合。

随后,者在bzip19/23株系中导入pZIP4::GUS构成空背景株系 ,与bZIP19基序的各种突变体进行过表达,以GUS的表达来代表bZIP19调控活性的表达。发现bzip19/23-pZIP4::GUS-bZIP19(del1del2)的分析显示,GUS染色在缺锌、充足或过剩之间没有明显差异(图1B),表明突变的bZIP19仍然能够激活ZIP4启动子,但不再对锌的供应变化做出响应。

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同时,作者还分析了bZIP19的其他基序变体,包括只有一半基序的缺失(bZIP19(Del1)和bZIP19(Del2)),以及Cys和His的氨基酸替换为Ala,包括替换所有的半胱氨酸残基(bZIP19(C44AC50AC63A)),前半个基序中只有一个C残基(bZIP19(C44A))或每个半基序中两个H残基(bZIP19(C44A))等,结果表明,富含Cys/His基序中的所有Cys和His残基都是必需的,都为Zn与蛋白结合提供足够的结构环境发挥着作用。

对种子的离子组学研究,发现bZIP19(del1del2)品系的种子锌浓度显著高于WT种子,相对于WT种子增加了约50%。

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拟南芥细胞锌感应工作模型

在缺锌条件下,转录因子与其靶基因启动子中的ZDRE结合,激活其转录在锌充足的条件下,细胞内游离或松散结合的锌离子与bZIP19和bZIP23特有的富含Cys/His的ZSM结合,这种锌与蛋白质的结合抑制了转录因子的活性。

综上所述,这些结果为bZIP19和bZIP23通过 Zn2+与其富含Cys/His的基序直接结合而发挥锌传感器作用提供了有力的证据,作者建议将这个富含Cys/His的基序称为锌传感器基序(ZSM)由于陆地植物中锌传感器基序在bZIP蛋白中高度保守,该植物锌传感器的鉴定将有助于提高植物来源的食品和饲料中的锌,并有助于解决全球锌缺乏症的健康问题。

原文链接:http://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzIyOTY2NDYyNQ==&mid=2247508756&idx=5&sn=8b48b6ce90f2aafa0cd55384fa027c55

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启动子 bZIP19 基序 bZIP23

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