一种鉴定春兰品种的方法

• 摘要：

  本发明提供一种春兰品种分子鉴定方法,是基于简单重复序列基因组分析的春兰品种分子鉴定方法,通过优化春兰简单重复序列(SSR)分析的技术体系,明晰春兰品种的遗传关系.本发明直接检测品种的DNA序列差异,既具有遗传稳定性,又具有信息多样性,可以明确区分和判别春兰的不同品种,实现准确、快速鉴定品种,从而为品种鉴定、种苗市场管理、品种保护及良种繁育等提供可靠技术.本发明优化春兰基因组DNA的SSR技术体系,使春兰品种分子鉴定速度快、时间短、多态性多,能够在交易前解决兰苗真实性检验等问题,避免造成生产者或购买者的损失.本方法运用1个及以上有效引物可以区分和鉴定所有春兰品种,实现春兰品种的DNA指纹鉴定.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201010120719.0

• 申请日期：

  2010.03.09

• 公开/公告号：

  CN101818199A

• 公开/公告日：

  2010-09-01

• 发明人：

  李方 黄焱 夏宜平 陈昆松

• 申请人：

  浙江大学

• 主分类号：

  C12Q1/68(2006.01)I

• 主权项：

  一种鉴定春兰品种的方法,通过以下步骤实现:(1)提取已知112个春兰品种基因组DNA;(2)对所提取的春兰品种基因组DNA分别进行聚合酶链式反应,得到简单重复序列产物;(3)以6％变性聚丙烯酰胺凝胶为介质对简单重复序列产物进行电泳分离,总上样量为5μL,其中4μL为扩增产物,另加1μL?Loading?Buffer,在60W下恒功率电泳至marker跑至胶板2/3处;(4)电泳结束后,经Bassam银染方法在数码相机下照相,分别得到简单重复序列标准图谱;(5)选择清晰简单重复序列图谱,采用"0-1"系统记录谱带,将有带的赋值为1,无带的赋值为0,读取春兰每个品种材料在不同引物扩增的产物的电泳谱带的数据,建立数据库;(6)基于Dice系数按非加权配对算术平均法进行聚类分析,得到系统聚类树;(7)将所需鉴定的春兰品种按上述步骤(1)-(5),得到所需要鉴定春兰品种的序列图谱,将此序列图谱与标准图谱进行比较判定,得到分析鉴定结果.