一种直接检测食源致病菌的高通量方法

• 摘要：

  本发明一种直接检测食源致病菌的高通量方法,涉及基于16S?rRNA和液相芯片的细菌高通量快检方法.包括以2-20种细菌的16S?rRNA作为测定靶标,设计捕获探针和检测探针;将附着有特异性捕获探针的2-20种微球、检测探针以及经细胞裂解处理的待测样品混合,形成"微球-捕获探针-特定细菌的16S?rRNA-检测探针"复合物;检测形成的复合物中不同微球的微球识别信号以及可检测标记物,从而确定待测样品中各待测细菌的存在与否以及存在的量.本发明的方法省略了传统分子生物学检测必须的PCR步骤,使检测变得更快、更简便、更合理,成本低廉.本发明还优化了可同时检测多种菌株的探针套组,检测效果良好.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201510198561.1

• 申请日期：

  2015.04.21

• 公开/公告号：

  CN106148502A

• 公开/公告日：

  2016-11-23

• 发明人：

  王慧 储瑞蔼 赵荣荣 邱红玲 李井泉

• 申请人：

  中国科学院上海生命科学研究院

• 主分类号：

  C12Q1/68(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1

• 分类号：

  C12Q1/68(2006.01)I,C12Q1/04(2006.01)I,C12Q1/10(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1,C12Q1/68,C12Q1/04,C12Q1/10

• 主权项：

  一种细菌快速检测方法,其特征在于,所述方法包括:(1)以2?20种细菌的16S?rRNA或其PCR扩增产物作为测定靶标,设计捕获探针和检测探针;所述的捕获探针是针对每种细菌的16S?rRNA或其PCR扩增产物特异性的探针,且其分别附着于2?20种微球上;所述的检测探针是与各细菌的16S?rRNA或其PCR扩增产物上共有序列互补的探针,且其包括一可检测标记物;所述的2?20种微球分别携带不同的微球识别信号;(2)将附着有特异性捕获探针的2?20种微球、检测探针以及经细胞裂解处理的待测样品混合;从而使待测样品中的特定细菌的16S?rRNA或其PCR扩增产物,与该特定细菌相应的捕获探针和微球,以及检测探针形成"微球?捕获探针?特定细菌的16S?rRNA或其PCR扩增产物?检测探针"复合物;(3)检测(2)形成的复合物中不同微球的微球识别信号以及可检测标记物,从而确定待测样品中各待测细菌的存在与否以及存在的量.