一种测定植物铵态氮利用效率的方法

• 摘要：

  本发明公开一种测定植物铵态氮利用效率的方法.将无性系组培苗分别培养在稳定氮同位素值不同的两种硝酸盐作为唯一氮源的培养基中;待组培苗经过5周培养后,测定上述两种硝酸盐培养下的组培苗叶片的稳定氮同位素值和叶片的碳氮摩尔比;同样,另取无性系组培苗,将其培养在铵盐分别与两种稳定氮同位素值不同的硝酸盐组成的混合氮源的培养基上;测定两种混合氮源培养下组培苗叶片稳定氮同位素值和叶片的碳氮摩尔比;计算组培苗利用硝酸盐的份额,据此计算在混合氮源培养下组培苗利用铵态氮的碳氮摩尔比,也即为组培苗铵态氮利用效率或待测植物铵态氮利用效率.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201710397367.5

• 申请日期：

  2017.05.31

• 公开/公告号：

  CN107449858A

• 公开/公告日：

  2017-12-08

• 发明人：

  吴沿友 张开艳 饶森 李环 方蕾 吴沿胜 赵丽华 刘丛强 王世杰

• 申请人：

  中国科学院地球化学研究所

• 主分类号：

  G01N33/00(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N33

• 分类号：

  G01N33/00(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N33,G01N33/00

• 主权项：

  一种测定植物铵态氮利用效率的方法,其特征在于:第一,通过植物组织培养技术获得同一基因型的无性系组培苗,通过调节培养基的激素比例使组培苗处于增殖阶段,形成无根的无性系组培苗;第二,通过同位素质谱仪测定用于配置植物组织培养的培养基中的硝酸盐的稳定氮同位素值,筛选出稳定氮同位素值差值大于10‰的两种硝酸盐,其稳定氮同位素值分别为δ¹⁵N₀₁和δ¹⁵N₀₂;分别将这两种硝酸盐作为唯一氮源配置培养基;第三,将上述无性系组培苗分别培养在上述稳定氮同位素值不同的两种硝酸盐作为唯一氮源的培养基中;第四,待组培苗经过5周培养后,分别测定上述两种硝酸盐作为唯一氮源的培养基培养下的组培苗叶片的稳定氮同位素值,其叶片稳定氮同位素值分别记为δ¹⁵N_N1和δ¹⁵N_N2;同时测定其中任意一种硝酸盐作为唯一氮源的培养基培养下的组培苗叶片的碳氮含量,计算其氮碳摩尔比,记为n;第五,选用铵盐配置植物组织培养的培养基,保证其稳定氮同位素值δ¹⁵N_A与δ¹⁵N₀₁或δ¹⁵N₀₂的差值均大于10‰;然后将铵盐分别与上述稳定氮同位素值不同的两种硝酸盐组成混合氮源,配置两种不同的混合氮源培养基;第六,同样,另取无性系组培苗,将其分别培养在上述两种不同的混合氮源培养基上;第七,同样,组培苗经过5周培养后,测定上述两种混合氮源培养下组培苗叶片稳定氮同位素值,铵盐与稳定氮同位素值为δ¹⁵N₀₁的硝酸盐组成的混合氮源培养下的组培苗叶片稳定氮同位素值记为δ¹⁵N_N1mix,铵盐与稳定氮同位素值为δ¹⁵N₀₂的硝酸盐组成的混合氮源培养下的组培苗叶片稳定氮同位素值记为δ¹⁵N_N2mix,同时测定其中任一种混合氮源培养下组培苗叶片的碳氮含量,计算其氮碳摩尔比,记为m;第八,依据δ¹⁵N_N1、δ¹⁵N_N2、δ¹⁵N_N1mix和δ¹⁵N_N2mix,可算出组培苗利用硝酸盐的份额F_nit,即待测植物利用硝酸盐的份额;第九,依据F_nit计算在混合氮源培养下组培苗铵态氮的利用份额F_a;第十,依据F_nit、m和n计算在混合氮源培养下组培苗利用铵态氮的碳氮摩尔比P;组培苗利用铵态氮的碳氮摩尔比P也即为组培苗铵态氮利用效率,即为植物铵态氮利用效率AUE.