基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法

• 摘要：

  本发明公开了一种基于体外共培养激活Notch-1信号通路的方法,属于生物信息学技术领域.该方法将乳腺癌细胞和稳定表达Notch-1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养后用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch-1配体的间质细胞;在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞,按1:1-2:1将稳定表达Notch-1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中培养而实现激活乳腺癌细胞中Notch-1信号通路.本发明模拟在体内环境中癌细胞中Notch-1与间质细胞表达的Jagged-1相互作用来激活Notch-1信号通路,克服了传统方法中过表达的标准量难以确定、转染的效率难以确定、部分细胞没有被转染的缺陷,避免了过表达方法中过表达无法全面有效的激活Notch-1信号通路、所得生物学结果不客观的情况.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201310686754.2

• 申请日期：

  2013.12.12

• 公开/公告号：

  CN104711227A

• 公开/公告日：

  2015-06-17

• 发明人：

  魏彦杰 张慧玲 彭丰斌 孟金涛 冯圣中

• 申请人：

  深圳先进技术研究院

• 主分类号：

  C12N5/09(2010.01)I,C,C12,C12N,C12N5

• 分类号：

  C12N5/09(2010.01)I,C12N5/077(2010.01)I,C,C12,C12N,C12N5,C12N5/09,C12N5/077

• 主权项：

  一种基于体外共培养激活Notch‑1信号通路的方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将乳腺癌细胞和稳定表达Notch‑1配体的间质细胞分别在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养;(2)待步骤(1)中的两种细胞分别生长到80%的密度,用PBS缓冲液清洗并收集稳定表达Notch‑1配体的间质细胞;(3)在含体积分数10%小牛血清的DMEM培养基中培养间质细胞,按1:1‑2:1将稳定表达Notch‑1配体的间质细胞加入到乳腺癌细胞中;共同培养0.5~48h,实现激活乳腺癌细胞中Notch‑1信号通路.