人羧酸酯酶1的生物发光检测试剂盒及其使用方法和应用

• 摘要：

  本发明涉及一种人羧酸酯酶1的生物发光检测试剂盒及其使用方法和应用.该试剂盒包括A液、B液、C液和质控标准品,所述A液为100mM磷酸盐缓冲液,pH＝5.5~10;所述B液为0.1~10mM含有人羧酸酯酶1的特异性生物发光探针底物的溶液;所述C液为荧光素检测试剂;所述质控标准品为5mg/ml的hCE1的pH 6.5的磷酸盐溶液.该探针底物为(S)‑2‑(2‑(6‑二甲氨基)‑苯并噻唑)‑4,5‑二氢噻唑‑4‑甲酸甲酯,可被hCE1特异性催化发生酯键水解反应,通过定量检测单位时间内其酯键水解产物的生成量来测定各类生物样品中hCE1酶的活性.该试剂盒可用于检测不同生物样本中hCE1的存在与否及其酶活性的定量测定,可用于快速筛选hCE1的抑制剂/诱导剂.本发明优点为操作简单、单位检测成本低、灵敏、快速、可高通量检测.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201610220979.2

• 申请日期：

  2016.04.08

• 公开/公告号：

  CN107271432A

• 公开/公告日：

  2017-10-20

• 发明人：

  杨凌 王丹丹 葛广波 邹立伟 王平 于洋 杜逊甫

• 申请人：

  中国科学院大连化学物理研究所

• 主分类号：

  G01N21/76(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N21

• 分类号：

  G01N21/76(2006.01)I,G01N33/68(2006.01)I,G,G01,G01N,G01N21,G01N33,G01N21/76,G01N33/68

• 主权项：

  一种人羧酸酯酶1的生物发光检测试剂盒,其特征在于该试剂盒包括如下四种试剂:A液、B液、C液和质控标准品;其中所述A液为100mM磷酸盐缓冲液,pH＝5.5~10,B液为0.1~10mM含有人羧酸酯酶1的特异性生物发光探针底物的溶液,溶剂为二甲基亚砜;C液为荧光素检测试剂,含0.5mM的ATP,10mM的Mg²⁺及50g/ml的荧光素酶;质控标准品为5mg/ml的hCE1的pH 6.5的磷酸盐溶液;所述人羧酸酯酶1(hCE1)的特异性生物发光探针底物为(S)‑2‑(2‑(6‑二甲氨基)‑苯并噻唑)‑4,5‑二氢噻唑‑4‑甲酸甲酯,可被hCE1特异性催化发生酯键水解反应并生成相应的羧酸产物(S)‑2‑(2‑(6‑二甲氨基)‑苯并噻唑)‑4,5‑二氢噻唑‑4‑甲酸,该探针底物和水解产物的结构如下: