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科技工作者之家 2020-03-23
来源:生物通
新型冠状病毒疫情还在肆虐,全球确诊者人数在不断增加,我们要继续对抗这场战“疫”。义翘神州依托自主开发的蛋白技术平台以及丰富的病毒蛋白研发经验,于1月22日全球发布新冠病毒关键抗原Spike蛋白,并陆续开发出一系列病毒蛋白、抗体试剂。截至目前,义翘神州已经成功筛选13个单克隆抗体,可以与新冠病毒或SARS病毒抗原(Spike蛋白和N蛋白)结合,并适用于IF、IHC、ELISA、WB等免疫检测。
新冠病毒抗体经多种应用验证,特异性高亲和力好新冠病毒抗原NP单抗助力陆军军医大学陈永文教授新研究
* indicated infiltrated lymphocytes, arrow indicated positive cells, ▲ glomerulus
在这项研究中,陈永文研究团队通过对85例经实验室确诊的COVID-19患者的回顾性研究,证实SARS-CoV-2病毒可直接感染人肾小管,导致急性肾小管损伤。研究人员检测了6例肾组织损伤的病例样本,采用义翘神州提供的SARS-CoV-2 NP兔单克隆抗体作为一抗(1:100),通过免疫组织化学方法检测了病毒核壳蛋白(NP)抗原的原位表达。结果表明,6份病理组织中均可见新冠病毒SARS-CoV-2 NP抗原在肾小管中积累,证实SARS-CoV-2病毒可直接感染人肾小管,从而引发急性肾衰竭,对老年患者及患有并发症的患者更加危险,并推测尿液也可能是传染途径。
NP单抗经WB验证,具有高亲和力
WB免疫印迹法也称为蛋白质印迹,利用抗原-抗体结合反应,可以检测蛋白质的特性,也可以检测抗体与蛋白的结合活性。利用新冠病毒的NP蛋白与单克隆抗体进行WB实验,结果显示SARS-CoV-2 NP单克隆抗体可识别低至0.5ng的重组蛋白,证实单抗具有高亲和力。
通过假病毒对抗体活性进行免疫荧光验证
构建具有感染能力的SARS-CoV-2 Spike假病毒,浸染ACE2的过表达293T细胞,加入抗体(1:60)孵育。免疫荧光染色显示SARS-CoV-2 Spike单克隆抗体可与侵染细胞的假病毒结合,证实抗体对Spike蛋白天然结构有良好识别力,适用于检测天然样本。
新冠病毒单抗用于ELISA试剂盒的研发
义翘神州已成功开发出新冠病毒S蛋白和N蛋白酶联免疫(ELISA)试剂盒,计划与合作伙伴开展临床验证工作。新冠病毒抗原检测ELISA试剂盒全部采用高亲和力单抗,特异性好,灵敏度高,可实现大量生产,批间差小。同时经过重组蛋白和假病毒检测验证,与抗体试剂联用,有望进一步提高临床样本检出率和准确度,解决核酸检测假阴性问题。
综上所述,义翘神州具有成熟的蛋白、抗体制备与筛选平台,拥有十年以上的开发经验,目前成功制备的多株新冠病毒单克隆抗体,经多应用,多样本验证,具有高特异性和高亲和力,可高效助力新冠病毒相关研究。
结合新冠病毒抗原蛋白的单抗列表:
来源:gh_c1fce5726992 生物通
原文链接:https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MjM5NzMwNjYyMg==&mid=2675532722&idx=4&sn=005d82b2b5863b610320d1e868efd357&chksm=bc51ca238b264335a180201170e249b8c168a83a8ef53bce0b6247b536dca864f77a617d987f#rd
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