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来源：MedSci梅斯
这篇研究的目的是为了识别人牙髓细胞(hDPCs)中的钙感受受体(CaSR)以及其在MTA诱导hDPCs成牙本质分化和矿化中的作用。
研究通过免疫组化和免疫荧光检测CaSR在人牙髓组织和hDPCs的表达。随后，hDPCs培养于含特定浓度MTA稀释液或混合了钙受体激动剂R-568 (a positive allosteric modulator of CaSR [Tocris Bioscience， Bristol， UK])的培养基内，通过CCK-8 (Dojindo Molecular Technologies， Kumamoto， Japan)检测细胞活性。通过碱性磷酸酶活性、茜素红S染色、实时定量PCR和western blot检测添加不同MTA稀释液， R-568和calcilytic Calhex 231 (a negative allosteric modulator of CaSR [Sigma-Aldrich， St Louis， MO])培养基内成牙本质分化相关基因/蛋白和CaSR的表达。
结果显示，CaSR轻微表达于中央部分的牙髓组织中，而强表达于成牙本质细胞层以及hDPCs的细胞膜和细胞质。CCK-8检测结果显示，最大细胞活性见于施加1：8的MTA稀释液培养基中。与未分化对照组相比，成牙本质分化诱导早期阶段的细胞低表达CaSR蛋白。混合1：8的MTA稀释液与0.1和1.0 μmol/L R-568显著增强细胞活性，但减弱碱性磷酸酶活性和矿化结节的形成，而添加1.0 μmol/L Calhex 231可以减弱这种负面作用。定量PCR结果显示，施加1 μmol/L R-568刺激的hDPCs中RUNX2， DSPP， DMP-1和OCN的基因表达明显增强。Western blot结果显示，单独施加MTA和R-568或混合施加并未明显改变CaSR和DSPP蛋白表达水平，而Calhex 231能够增强它们的表达。此外，施加R-568和Calhex 231刺激上调hDPCs内的AKT磷酸化水平。
结论：结果表明，CaSR表达于牙髓和hDPCs内，它以配体依赖的模式通过phosphoinositide 3-kinase/Akt通路正向或负向调节MTA诱导的hDPCs矿化。说明CaSR可以作为一个治疗靶点，以调节修复性牙本质形成。
原始出处：
Chen Y， Gao Y， et al. Identification of a Calcium-sensing Receptor in Human Dental Pulp Cells That Regulates Mineral Trioxide Aggregate-induced Mineralization. J Endod. 2019 May 21. pii： S0099-2399(19)30259-6. doi： 10.1016/j.joen.2019.03.019.
来源：MedSci_cn MedSci梅斯
原文链接：http://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzI0Njc5ODM4MQ==&mid=2247502544&idx=7&sn=76081ddb7ecdbe2648faa98ad6fda8d9&chksm=e9bb4b92deccc2841b0780eb24957fcb31a1d88bcb7f541f691337318b8e8136243c7f6461fd&scene=27#wechat_redirect
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