R-环技术

R-环技术也是检测核酸杂交的技术。杂交后的分子可以直接在电子显微镜下显示出特定的构象。

在双链DNA分子部分变性的情况下，单链的RNA分子与相应的DNA分子中的一条链互补形成RNA-DNA杂种分子，同时另一条DNA单链向外突出形成环状图象，称之为R-环，该技术由此得名。在电镜图象中，双链区比单链区线条粗，很易分辨。真核生物成熟的mRNA分子与其DNA分子杂交，由于内含子顺序不与mRNA互补而形成R-环，所以可用来研究真核生物基因的结构，根据R-环的数目可确定内含子的数目。

简介R-环技术也是检测核酸杂交的技术。杂交后的分子可以直接在电子显微镜下显示出特定的构象。1

机理在双链DNA分子部分变性的情况下，单链的RNA分子与相应的DNA分子中的一条链互补形成RNA-DNA杂种分子，同时另一条DNA单链向外突出形成环状图象，称之为R-环，该技术由此得名。在电镜图象中，双链区比单链区线条粗，很易分辨。真核生物成熟的mRNA分子与其DNA分子杂交，由于内含子顺序不与mRNA互补而形成R-环，所以可用来研究真核生物基因的结构，根据R-环的数目可确定内含子的数目。1

核酸分子杂交根据异源单链核酸分子间因结构互补发生共价键结合，能形成互补杂合双链，而进行分子遗传学研究的一种技术。双链核酸分子加热至80～100℃时，碱基对之间的氢键断开，形成两条单链，这一过程叫作核酸的变性作用或解链。变性的核酸分子慢慢冷却，互补的碱基对之间又会重新形成双链分子，这一过程叫作核酸的复性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的环境中也会变性，当条件适合时又可复性。核酸分子杂交技术是基于核酸变性与复性的原理。

利用核酸杂交技术进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或荧光物质标记，制成探针(见核酸分子探针)，再与另一种核酸单链杂交。1

杂交方法核酸分子杂交有液相和固相两种方法。液相法的核酸单链分子都在溶液中，通过分子运动进行杂交固相法是将一种核酸单链固定在不溶性的介质上。另一种核酸单链在溶液中与固定的核酸分子进行杂交。常用的固相介质有硝酸纤维膜、尼龙纤维膜、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。1

本词条内容贡献者为:

吴俊文 - 博士 - 厦门大学