索森印迹法

高分子量DNA用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳，使不同大小的DNA片段分离，并直接在胶上变性，然后利用毛细作用(现常用电转移技术)，将它们转移到硝酸纤维膜或尼龙纤维膜上，这一过程称为吸印。膜上的DNA被固定后与核酸探针(DNA或RNA)杂交。同位素探针通过放射自显影显示结果，荧光探针杂交的结果以荧光显示。这一极为灵敏和有效的核酸杂交技术是以它的发明人索森(E.M.Southern)的姓命名的。

简介高分子量DNA用限制性内切酶消化后，经琼脂糖凝胶电泳，使不同大小的DNA片段分离，并直接在胶上变性，然后利用毛细作用(现常用电转移技术)，将它们转移到硝酸纤维膜或尼龙纤维膜上，这一过程称为吸印。膜上的DNA被固定后与核酸探针(DNA或RNA)杂交。同位素探针通过放射自显影显示结果，荧光探针杂交的结果以荧光显示。这一极为灵敏和有效的核酸杂交技术是以它的发明人索森(E.M.Southern)的姓命名的。1

核酸分子杂交根据异源单链核酸分子间因结构互补发生共价键结合，能形成互补杂合双链，而进行分子遗传学研究的一种技术。双链核酸分子加热至80～100℃时，碱基对之间的氢键断开，形成两条单链，这一过程叫作核酸的变性作用或解链。变性的核酸分子慢慢冷却，互补的碱基对之间又会重新形成双链分子，这一过程叫作核酸的复性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的环境中也会变性，当条件适合时又可复性。核酸分子杂交技术是基于核酸变性与复性的原理。

利用核酸杂交技术进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素或荧光物质标记，制成探针(见核酸分子探针)，再与另一种核酸单链杂交。1

杂交方法核酸分子杂交有液相和固相两种方法。液相法的核酸单链分子都在溶液中，通过分子运动进行杂交固相法是将一种核酸单链固定在不溶性的介质上。另一种核酸单链在溶液中与固定的核酸分子进行杂交。常用的固相介质有硝酸纤维膜、尼龙纤维膜、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶等。1

本词条内容贡献者为:

吴俊文 - 博士 - 厦门大学