目标触发三维DNA步行机联合核酸外切酶III辅助的电化学比率生物传感器

孙熙宸 2019-12-19

来源:X一MOL资讯

外泌体是细胞外囊泡,大小分布为30-100 nm。很多细胞都可以分泌外泌体,包括癌细胞、上皮细胞和白细胞等。其存于各种体液中,包括血液、唾液、尿液和乳汁。外泌体可以携带大量来源于母细胞的分子信息(核酸、蛋白质和脂质),并通过细胞膜融合将这些信息传递给受体细胞。研究表明,肿瘤相关的外泌体有助于肿瘤的转移、发展和免疫调节。由于外泌体在采集时具有损伤小的优点,因而被认为在癌症液体活检中具有巨大的潜力。传统的外泌体分析方法有免疫蛋白印迹和酶联免疫吸附法。然而这些方法存在需要大量样品、灵敏度低、操作时间长等缺点。而纳米粒子追踪法缺乏特异性。由于外泌体在癌症早期的浓度相对较低,因此开发灵敏的检测方法具有重要意义。近年来,一些新的外泌体检测方法得到了应用,如表面增强拉曼散射、表面等离子体共振、荧光、比色法、电化学等。

近日,青岛科技大学张晓茹团队开发了目标触发三维DNA步行机联合核酸外切酶III辅助的电化学比率生物传感器。DNA步行器可以在核酸内切酶、DNA辅酶、循环链置换驱动下沿着设计好的寡核苷酸轨道自主移动。随着步行器的运动,由轨道破坏产生的单链DNA被释放。将DNA步行器应用于外泌体的识别中,可以释放大量单链DNA用于信号放大。另外电化学分析具有高灵敏度,便携性和低成本的优点。而电化学比率检测具有降低背景干扰,提高检测准确性及灵敏度的优点。将DNA步行器与比率型电化学分析相结合,则可以扩展DNA步行器的应用。在DNA适配体的辅助下,该团队利用外泌体触发的三维DNA步行机联合核酸外切酶III辅助电化学比率生物传感器对外泌体进行超敏检测。在最佳条件下,检测限为1.3×104 particles/mL,并具有良好的选择性。此外,实验还验证了在人血样中检测外泌体的临床应用。

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这一成果近期发表在Analytical Chemistry 上,文章的第一作者是青岛科技大学硕士研究生赵丽,通讯作者为张晓茹教授。该研究得到国家自然科学基金项目(21775080)的资助。

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