一种对细胞内端粒酶活性原位成像的纳米探针及其制备方法

• 摘要：

  本发明涉及一种可对细胞内端粒酶活性进行原位成像检测的纳米探针及其制备方法.纳米探针以金纳米粒子(AuNP)为载体,负载特殊设计的DNA分子信标(MB).该MB为茎-环结构,并带有一个缺口,将整个DNA序列分为两段:较短的一段是端粒酶引物序列(TSP);较长的一段(1-MB)含环状结构,其茎部3'端的巯基可共价连接AuNP,5'端修饰荧光分子Cy5.由于荧光共振能量转移,Cy5的荧光被AuNP猝灭,纳米探针的荧光状态为"关".将探针与细胞温育,探针进入细胞后,在细胞质内端粒酶的作用下,TSP被延长并发生内部链取代,使1-MB环被打开,导致Cy5离开AuNP表面,将荧光状态转换为"开",进而利用激光共聚焦荧光显微镜观察Cy5的荧光,可实现细胞内端粒酶活性的原位成像分析.该探针可区分肿瘤和正常细胞,还可用于监测细胞内端粒酶活性在端粒酶抑制药物作用下的变化,因此该发明具有良好的应用前景.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201410193997.7

• 申请日期：

  2014.05.09

• 公开/公告号：

  CN103993078A

• 公开/公告日：

  2014-08-20

• 发明人：

  鞠熀先 丁霖 钱若灿

• 申请人：

  南京大学

• 主分类号：

  C12Q1/68(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1

• 分类号：

  C12Q1/68(2006.01)I,C12Q1/48(2006.01)I,C12Q1/02(2006.01)I,C,C12,C12Q,C12Q1,C12Q1/68,C12Q1/48,C12Q1/02

• 主权项：

  一种可对细胞内端粒酶活性进行原位成像检测的纳米探针,其特征为以金纳米粒子(AuNP)为载体,负载带有一个缺口的DNA分子信标(MB).该MB为茎‑环结构,并带有一个缺口,将MB分为两段:较短的一段是端粒酶引物序列(TSP);较长的一段(1‑MB)含环状结构,其茎部3'端的巯基可共价连接AuNP,5'端修饰荧光分子Cy5.