一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针及其制备方法与应用

• 摘要：

  本发明公开了一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针及其制备方法与应用,该荧光探针为HBTP‑Cu2+复合物,且本发明公开的HBTP‑Cu2+复合物以HBTP和硫代胆碱(经乙酰胆碱酯酶特异性催化乙酰胆碱产生)与Cu2+的竞争结合作为基本作用机制,并以HBTP发光作为荧光信号报告基团.当向体系中加入乙酰胆碱酯酶时,硫代胆碱可与HBTP‑Cu2+复合物结构中的Cu2+配位结合,复合物结构从而瓦解,HBTP的存在形式由有序聚集转变为单体分散在体相溶液中,并产生溶液的颜色和荧光变化.通过核磁共振法、紫外‑可见吸收光谱法、荧光光谱法研究了其对乙酰胆碱酯酶的识别效果,结果表明HBTP‑Cu2+复合物在纯水溶剂体系中能够高效选择性识别乙酰胆碱酯酶,且对乙酰胆碱酯酶具有很高的灵敏度.

• 专利类型：

  发明专利

• 申请/专利号：

  CN201910245600.7

• 申请日期：

  2019.03.28

• 公开/公告号：

  CN110028503A

• 公开/公告日：

  2019-07-19

• 发明人：

  丁彩凤 傅彩霞 张倩 张鹏

• 申请人：

  青岛科技大学

• 主分类号：

  C07D417/10(2006.01),C,C07,C07D,C07D417

• 分类号：

  C07D417/10(2006.01),C09K11/06(2006.01),G01N21/64(2006.01),C,G,C07,C09,G01,C07D,C09K,G01N,C07D417,C09K11,G01N21,C07D417/10,C09K11/06,G01N21/64

• 主权项：

  1.一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针,其特征在于,所述荧光探针为HBTP-Cu2+复合物,且所述HBTP-Cu2+复合物的结构单元HBTP的结构式为: 2.一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针的制备方法,其特征在于,所述方法具体步骤如下所述: 室温下于PBS缓冲溶液中加入探针母液和CuCl2溶液,搅拌发生配位反应,得到目标产物HBTP-Cu2+复合物荧光探针. 3.根据权利要求2所述的一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针的制备方法,其特征在于,所述PBS缓冲溶液的pH值控制在7.5~8.5之间. 4.根据权利要求2所述的一种测定乙酰胆碱酯酶的荧光探针的制备方法,其特征在于,所述探针母液与所述CuCl2溶液的摩尔比为2:1,且所述探针母液的浓度为2.0~3.0mmol/L,所述CuCl2溶液的浓度为0.05~0.20mol/L. 5.如权利要求1所述的荧光探针或根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法制备的荧光探针在溶剂体系中选择性识别乙酰胆碱酯酶的应用. 6.根据权利要求5所述的荧光探针在溶剂体系中选择性识别乙酰胆碱酯酶的应用,其特征在于,所述溶剂体系中,水的体积百分数为95~100％. 7.如权利要求1所述的荧光探针或根据权利要求2所述的荧光探针的制备方法制备的荧光探针进入细胞中检测细胞内源性乙酰胆碱酯酶中的应用.