PAS染色法

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。1

原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。

方法固定液Carnoy固定液： 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 **30ml,**也可以选用75%酒精。

液配制1) 过碘酸酒清夜配法:

过碘酸**(HIO4·2H2O) 0.4g** 95%酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml。

保存于冰箱内，用棕色瓶，可用两周。

2)Schiff氏液:

0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中，时时摇动三角瓶5分钟，使之充分溶解。冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸，冷却至25℃，加入0.5-1克偏重硫酸钠，在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。

3) Schiff氏酒精液配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 纯酒精 23ml

4) 亚硫酸水 1%偏重亚硫酸钠10ml 1N HCI 10ml 蒸馏水 180ml的树胶溶解。

5）哈瑞或迈耶苏木精

染色步骤1. 石蜡切片脱蜡至水（细胞涂片，冰冻切片直接水洗）；

2. 蒸馏水洗；

3. 过碘酸酒清夜10min；

4. 自来水冲洗10min；

5. Schiff氏液10min；

6. 流水冲洗5min；

7.用哈瑞苏木精或迈耶苏木精染核3min(细胞核染色过深可用盐酸酒精分化）；

8. 流水冲洗5min；

9. 常规脱水、透明、封固。

结果PAS阳性为红色，细胞核蓝色。

实验效果准备1、10g/L过碘酸液

2、Schiff染液：

碱性品红 0.5g

DH2O 100ml

煮沸后，待片刻，加入碱性品红，振荡数分钟使品红溶解，冷至50℃加入1M的盐酸20ml，混匀。待冷却至25℃加入偏重亚硫酸钠0.5g，混合，置于带塞的棕色瓶中，放于暗处24小时，染液为无色，如为微红则加活性炭1－2g，混合过滤，如过滤液仍有红色，应再加少许活性炭，时红色完全被吸收为止。制成后置于棕色瓶内保存在冰箱备用，如变为红色，则不能使用。

4、苏木素液：

苏木素 0.9g

95%乙醇 10ml

铵（钾）明矾 20g

DH2O 200ml

将苏木素溶于95%的乙醇，钾明矾溶于水（可加热），然后将苏木素液加入明矾液中混合，用强火煮沸后加氧化汞0.5g，迅速搅拌，成深紫色，迅速移入冷水中，次日过滤，临用时取此液95ml加冰醋酸5ml，可使细胞着色清楚。

方法1、将新鲜血片或骨髓片用95%乙醇固定10分钟；

2、10g/L过碘酸液作用20分钟；

3、DH2O洗涤几次，晾干；

4、Schiff染液，60分钟；

5、用自来水洗涤15分钟（细水长流冲洗）；

6、苏木素染液10分钟；

7、自来水冲洗15分钟，待干。

结果阳性反应，胞浆呈红色，阴性反应，胞浆呈无色；在正常血片中RBC不染色；PLT染成深红色；中性粒细胞胞浆染成红色或深红色，有些细胞有阳性颗粒；单核细胞的胞浆染成淡红色，可含有细小或粗大阳性颗粒；少数淋巴细胞的胞浆内含有少许小的淡红色或红色颗粒；正常骨髓的幼稚细胞和有核RBC都不染色；巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色。巨核细胞的胞浆内呈弥散红色或深红色。

应用随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分类和治疗提供 了重要的依据。1

本词条内容贡献者为:

杜强 - 高级工程师 - 中国科学院工程热物理研究所