云南大学王建光、陈穗云研究团队揭示真菌多肽介导的TMV抗性机制

科技工作者之家 2021-03-06

来源:植物生物学

近几十年来,植物病毒给世界各地的农业和园艺造成了巨大损失。烟草花叶病毒(TMV)为RNA病毒,是烟草花叶病等的病原体,是目前烟草生产上分布最广、发生最为普遍的一类病害,目前仍缺乏安全有效的TMV防治方法。研究发现,真菌提取物(如蛋白质、多糖等)可以保护烟草免受TMV侵害。尽管产黄青霉干菌丝体的多肽提取物(PDMP已被报道在田间条件下能够诱导多种植物产生抗性,但至今极少有人研究PDMPTMV抗性的影响及其作用机制。

近日,云南大学生命科学学院王建光副教授和陈穗云教授团队在Journal of Experimental Botany发表了题为Penicilliumchrysogenum polypeptide extract protects Nicotiana benthamiana against TMV infection through modulation ofABA biosynthesis and callose priming的研究论文,揭示了产黄青霉多肽提取物(PDMP)通过ABA生物合成途径介导胼胝质沉积来抑制TMV在胞间连丝的运动,从而增强烟草植株对TMV的抗性。

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为探究PDMP诱导烟草TMV抗性反应的潜在机制,作者首先进行了RNA-seq比对分析,发现β-1,3-葡聚糖酶ABA2编码基因PDMP/TMVTMV之间差异表达。由于β-1,3-葡聚糖酶和ABA2分别与胼胝质降解和ABA生物合成相关,推测PDMP可能通过诱导胼胝质沉积抑制TMV运动。此外,ABA合成途径也可能在PDMP诱导的TMV抗性反应启动中起重要作用为此,作者通过农杆菌侵染结合CRISPR/Cas9基因编辑技术获得了烟草ABA合成突变体。

为研究PDMPTMV抗性的影响,利用苯胺蓝染色观察GFP标记的TMV运动和胼胝质沉积情况。结合GFP荧光量化结果以及蛋白免疫印迹实验,发现PDMP能够促进胞间连丝周围的胼胝质沉积以抑制野生型植株中TMV的运动,但这种现象在ABA合成突变体中并未发生。而外源ABA处理可以挽救突变体PDMP对胼胝质沉积的促进作用以及对TMV的抗性反应(图1),表明PDMP诱导的胼胝质沉积依赖于ABA生物合成。

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1. GFP-TMV运动情况

为进一步验证以上结果,利用透射电镜对胞间连丝的超微结构进行观察,结果发现PDMP可诱使野生型植株胞间连丝变窄,而在突变体中无影响。但与上述实验结果类似的是,ABA处理又可使该表型恢复(图2)。

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2. 胞间连丝结构参数

综上表明,PDMP通过ABA生物合成途径诱导胼胝质在胞间连丝周围沉积,以增强烟草对TMV的抗性。该项研究得到了云南省基础研究计划和国家自然科学基金的资助与支持。

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烟草 抗性 TMV

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